Chimie Lucrare de Lab NR 1 Proteine [PDF]

Zitiervorschau

Lucrarea practice Nr.1: „Identificarea proteinelor. Investigarea acțiunii factorilor de denaturare a proteinelor.” Reactivi: albuș de ou, HNO3(conc.), HCl, NaOH, CuSO4, (CH3COO)Pb. Ustensile: spirtiere, pipete, hârtia de filtru/albă, pahare gradate, stativ cu eprubete, baghete de sticlă Experiența nr. 1 Preparea soluției de proteină Modul de lucru

Observații

Se amestecă prin agitare Albușul de ou cu apa cu o baghetă din sticlă formează o soluție albușul dintr-un ou de coloidală găină în 100 ml apă distilată. Se filtrează conţinutul prin tifon sau hârtie de filtru. Se obține o soluţie limpede care se va utiliza pentru alte determinări.

Concluzii Proteinele din albușul de ou sunt solubile în apă.

Experiența nr. 2 Reacțiile de culoare Modul de lucru a) Peste 3 ml soluție de proteină într-o eprubetă se adaugă 4 ml soluţie. NaOH 40%. Se fierbe 5 minute până se limpezeşte. Se adaugă 1 ml soluţie concentrată de sulfat de cupru. b) Peste 3 ml soluție de proteină se adaugă 1ml acid azotic concentrat. Fierbeţi amestecul.

Observații Se va colora amestecul în albastru – violet intens.

Concluzii

reacția xanoproteică proba biuretică

Această culoare apare datorită formării unor combinaţii complexe între proteină sau aminoacizi şi ioni de cupru divalenţi.

Se formează un precipitat alb. Dacă amestecul se fierbe se va forma o colorație galben intens până la portocaliu.

Această culoare apare datorită formării unor combinaţii complexe între proteină sau aminoacizi şi ioni de cupru divalenţi Cu2+

Experiența nr. 3 Denaturarea proteinelor Modul de lucru Pentru a urmări o denaturare fizică se ia o porțiune mică din soluția de proteină şi se încălzeşte. Pentru o denaturare chimică se adaugă acid clorhidric /acid sulfuric peste soluția de proteină.

Observații Se modifică complet aspectul soluției, dacă încălzirea ireversibilă. încetează nu revine la aspectul inițial. Se formează un sediment alb.

Concluzii A avut loc o denaturare termică ireversibilă.

A avut loc o denaturare chimică ireversibilă. În ambele cazuri au fost afectate iremediabil structurile secundare, terțiare şi cuaternare ale proteinelor, neexistând posibilitatea refacerii lor în forma inițială, după îndepărtarea agentului extern.

Concluzii: 1. Proteinele din albușul de ou sunt solubile în apă. 2. Denaturarea este un proces care se realizează sub acţiunea unui agent chimic sau fizic. 3. Denaturarea este cauzată de desfacerea legăturilor de hidrogen dintre lanțurile macromoleculare şi de modificarea structurilor secundare, terţiare şi cuaternare. 4. Reacţia biuretică şi cea xantoproteică sunt reacţii de identificare a proteinelor.