31 0 3MB
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NAM CẦN THƠ KHOA DƯỢC – BỘ MÔN DƯỢC LIỆU
BÀI BÁO CÁO MÔN PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU DƯỢC LIỆU Đề tài: XÂY
DỰNG TIÊU CHUẨN DƯỢC LIỆU LÁ
TÍA TÔ (Perilla Frutescens (L.) Britt)
Cần Thơ, 2017
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NAM CẦN THƠ KHOA DƯỢC – BỘ MÔN DƯỢC LIỆU
BÀI BÁO CÁO MÔN PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU DƯỢC LIỆU
Đề tài: XÂY
DỰNG TIÊU CHUẨN DƯỢC LIỆU LÁ
TÍA TÔ (Perilla Frutescens (L.) Britt)
GVHD: Ths. Thái Thị Cẩm
Sinh viên thực hiện: Lê Nhi Xuân Lớp: DH13DUO02 MSSV: 1331100159 SĐT: 01224026114 Mail: [email protected]
Cần Thơ, 2017
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô
LỜI CẢM ƠN Trong suốt quá trình thực hiện bài báo cáo, em đã nhận được nhiều sự quan tâm, giúp đỡ của quý thầy cô, gia đình và bạn bè. Trước hết, em xin chân thành cảm ơn cô Thái Thị Cẩm đã tạo cơ hội và hướng dẫn em trong thời gian thực hiện bài báo cáo. Em cũng xin gửi lời cảm ơn đến các anh chị trong phòng thí nghiệm Dược liệu, trường Đại học Nam Cần Thơ đã nhiệt tình giúp đỡ, đóng góp ý kiến để em có thể hoàn thành tốt bài báo cáo. Chân thành cảm ơn gia đình và bạn bè đã động viên, hỗ trợ về cả tinh thần lẫn vật chất.
Cần Thơ, ngày 8 tháng 12 năm 2017 Người thực hiện Lê Nhi Xuân
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô
MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN ..................................................................................................................3 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ............................................................................... iv DANH MỤC CÁC HÌNH ...............................................................................................v DANH MỤC CÁC BẢNG VÀ SƠ ĐỒ ....................................................................... vii ĐẶT VẤN ĐỀ .................................................................................................................1 CHƯƠNG I......................................................................................................................2 TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU .......................................................................................2 1
Tổng quan về thực vật học ......................................................................................2 1.1
Tên gọi ...............................................................................................................2
1.2
Nguồn gốc xuất xứ .............................................................................................2
1.3
Phân loại .............................................................................................................3
1.4
Đặc điểm hình thái .............................................................................................4
1.4.1
Thân .............................................................................................................4
1.4.2
Lá .................................................................................................................4
1.4.3
Hoa ..............................................................................................................6
1.4.4
Quả ..............................................................................................................7
1.5
Phân bố, sinh thái và thu hái ..............................................................................8
1.6
Bộ phận dùng .....................................................................................................9
1.7
Thành phần hóa học trong lá Tía tô ...................................................................9
1.8
Tác dụng dược lý của lá Tía tô ........................................................................11
1.8.1
Tác dụng ức chế vi khuẩn .........................................................................11
1.8.2
Tác dụng chống oxy hóa ...........................................................................11
1.8.3
Tác dụng chống ung thư ............................................................................11
1.8.4
Tác dụng kháng nấm .................................................................................12
1.8.5
Tác dụng điều vị ........................................................................................12
1.8.6
Tác dụng kháng viêm và chống dị ứng .....................................................12
1.8.7
Tác dụng khác ...........................................................................................13
1.9
Công dụng của lá Tía tô ...................................................................................13
i
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô
2
1.10
Tính vị và quy kinh của lá Tía tô ..................................................................13
1.11
Liều dùng ......................................................................................................13
1.12
Kiêng kỵ .......................................................................................................13
1.13
Các bài thuốc và chế phẩm từ lá Tía tô ........................................................14
1.13.1
Các bài thuốc từ Tía tô ...........................................................................14
1.13.2
Các chế phẩm từ lá Tía tô ......................................................................14
Tiêu chuẩn chất lượng trong DĐVN IV và các phương pháp tiến hành ...............15 2.1
Vi phẫu .............................................................................................................15
2.2
Khảo sát bột dược liệu .....................................................................................15
2.3
Phân tích định tính ...........................................................................................15
2.4
Phân tích định lượng ........................................................................................16
2.5
Các chỉ tiêu khác ..............................................................................................16
2.5.1
Độ ẩm ........................................................................................................16
2.5.2
Tạp chất .....................................................................................................17
2.5.3
Dư lượng thuốc bảo vệ thực vật ................................................................17
2.5.4
Tro toàn phần ............................................................................................17
2.5.5
Tỷ lệ vụn nát..............................................................................................17
2.5.6
Chế biến.....................................................................................................17
2.5.7
Bào chế ......................................................................................................17
2.5.8
Bảo quản ....................................................................................................17
2.5.9
Tính vị, quy kinh .......................................................................................17
2.5.10
Công năng, chủ trị ..................................................................................17
2.5.11
Cách dùng, liều lượng ............................................................................17
2.5.12
Tương kỵ ................................................................................................17
CHƯƠNG 2 ...................................................................................................................18 KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM.........................................................................................18 1
Mô tả thực vật ........................................................................................................18
2
Đặc điểm vi học .....................................................................................................20 2.1
Vi phẫu lá Tía tô ..............................................................................................20
2.1.1
Lá ...............................................................................................................20
ii
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô
3
2.1.2
Phiến lá ......................................................................................................23
2.1.3
Cuống lá ....................................................................................................23
2.2
Bóc tách biểu bì lá Tía tô .................................................................................25
2.3
Soi bột lá Tía tô ................................................................................................26
Phân tích thành phần hóa thực vật .........................................................................30 3.1
Chiết xuất dược liệu .........................................................................................30
3.2
Phân tích sơ bộ thành phần hóa học .................................................................31
3.2.1
Dịch chiết ether .........................................................................................31
3.2.2
Dịch chiết cồn ...........................................................................................32
3.2.3
Dịch chiết nước .........................................................................................33
3.3
4
Định tính tinh dầu bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng ..................................37
3.3.1
Chiết tinh dầu lá tía tô ...............................................................................37
3.3.2
Định tính tinh dầu lá tía tô bằng sắc ký lớp mỏng ....................................38
Độ ẩm của bột dược liệu lá tía tô...........................................................................39
Chương 3 .......................................................................................................................40 XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN DƯỢC LIỆU LÁ TÍA TÔ .............................................40 1
Định nghĩa .............................................................................................................40
2
Đặc điểm cảm quan ...............................................................................................40
3
Đặc điểm vi phẫu ...................................................................................................40 3.1.1
Lá ...............................................................................................................40
3.1.2
Phiến lá ......................................................................................................40
3.1.3
Cuống lá ....................................................................................................40
4
Đặc điểm bột lá tía tô.............................................................................................41
5
Đặc điểm bóc tách biểu bì lá tía tô ........................................................................41
6
Định tính tinh dầu lá tia tô bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng ..........................41
7
Độ ẩm bột dược liệu lá tía tô .................................................................................41
CHƯƠNG 4 ..................................................................................................................42 NHẬN XÉT ...................................................................................................................42 TÀI LIỆU THAM KHẢO .............................................................................................44
iii
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô
DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT DPPH
2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl.
TNF – α
Yếu tố hoại tử khối u – α.
IL 6
Interleukin – 6.
IL-1β
Interleukin - 1 beta.
IL-8
Interleukin - 8.
RA
Rosmarinic acid.
PMNL
Polymorphonuclear leukocytes.
SAR
Seasonal allergic rhinoconjunctivitis - viêm giác mạc dị ứng theo mùa.
IgE
Quantitative immunoglobulin E - globulin miễn dịch.
TFA
Acid trifluorooctetic.
HPLC
High Performance Liquid Chromatography - sắc ký lỏng hiệu năng
cao. TT
Thuốc thử.
ĐĐ
Đậm đặc.
DD
Dung dịch.
iv
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô
DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1:Thân và cành vuông, có nhiều lông (thực tế). ................................................ 4 Hình 2: Cấu tạo mặt trên và mặt dưới lá tía tô ........................................................... 5 Hình 3:Chiều dài và chiều rộng lá tía tô ..................................................................... 5 Hình 4: Chiều dài cuống lá và lá mọc đối chéo chữ thập. ......................................... 5 Hình 5: Hoa không đều, mẫu 5 và có lá bắc hình trứng, đầu nhọn. ........................... 6 Hình 6: Cụm hoa mọc ở ngọn hoặc ở nách lá. ........................................................... 6 Hình 7: Hoa mọc đối chéo hình chữ thập .................................................................. 7 Hình 8: Hoa thức và hoa đồ cây tía tô ........................................................................ 7 Hình 9: Cấu tạo quả tía tô ........................................................................................... 8 Hình 10: Trà lá tía tô ................................................................................................ 14 Hình 11: Sen sấy lá tía tô .......................................................................................... 14 Hình 12: Nước tía tía tô ............................................................................................ 14 Hình 13: Bột lá tía tô ................................................................................................ 14 Hình 14: Nước sốt hương chanh và tía tô ................................................................. 14 Hình 15: Lá mọc đối chéo hình chữ thập, lá non màu tím. ...................................... 18 Hình 16: Đặc điểm cảm quan lá tía tô ...................................................................... 19 Hình 17: Chiều rộng và chiều dài lá tía tô ............................................................... 19 Hình 18: Chiều dài cuống lá và cấu tạo mặt trên - dưới lá tía tô.............................. 19 Hình 19: Lá tía tô phơi khô ...................................................................................... 20 Hình 20: Cấu tạo vi phẫu lá tía tô ............................................................................ 21 Hình 21: Lông tiết và lông tiết hình bán nguyệt....................................................... 21 Hình 22: Lông che chở đa bào và tinh thể calci oxalat hình kim. ............................ 22 Hình 23: Lớp cutin mỏng có răng cưa và mô mềm đạo. .......................................... 22 Hình 24: Mô dày góc và lỗ khí ở lá tía tô ................................................................. 22 Hình 25: Cấu tạo libe - gỗ của lá tía tô ..................................................................... 23 Hình 26: Cấu tạo phiến lá ......................................................................................... 23 Hình 27: Cấu tạo vi phẫu cuống lá tía tô. ................................................................. 24 Hình 28: Cấu tạo libe - gỗ cuống lá tía tô................................................................. 25
v
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô Hình 29: Cấu tạo libe - gỗ phụ cuống lá tía tô ......................................................... 25 Hình 30: Lỗ khí kiểu trực bào (mặt trên lá).............................................................. 25 Hình 31: Lỗ khí kiểu trực bào (mặt dưới lá) ............................................................ 25 Hình 32: Bột lá tía tô ................................................................................................ 26 Hình 33: Lông che chở đa bào và đứt gãy. ............................................................... 26 Hình 34: Mạch vạch và mạch mạng. ........................................................................ 26 Hình 35: Mạch xoắn và tinh thể calci oxalat hình khối............................................ 27 Hình 36: Tinh thể calci oxalat hình cầu gai và biểu bì phiến lá mang ..................... 27 Hình 37: Lông tiết đầu đa bào, cuống rất ngắn và mảnh biểu bì gân lá. .................. 27 Hình 38: Cấu tạo vi phẫu lá tía tô (vẽ tay). .............................................................. 28 Hình 39: Cấu tạo vi phẫu cuống lá tía tô (vẽ tay) ..................................................... 28 Hình 40: Các cấu tử trong bột lá tía tô (vẽ tay). ....................................................... 29 Hình 41: Bóc tách biểu bì lá tía tô (vẽ tay)............................................................... 29 Hình 42: Kết quả định tính carotenoid........................................................................31 Hình 43: Kết quả định tính triterpenoid......................................................................31 Hình 44: Kết quả định tính tinh dầu............................................................................32 Hình 45: Kết quả định tính flavonoid trong dịch chiết cồn.........................................32 Hình 46: Kết quả định tính chất khử...........................................................................33 Hình 47: Kết quả định tính anthocyanosid..................................................................33 Hình 48: Kết quả định tính proanthocyanidin.............................................................34 Hình 49: Kết quả định tính polyphenol.......................................................................34 Hình 50: Kết quả định tính flavonoid trong dịch chiết nước......................................35 Hình 51: Hệ thống chiết tinh dầu................................................................................38 Hình 52: Sản phẩm tinh dầu lá tía tô...........................................................................38 Hình 53: Cân sấy ẩm hồng ngoại OHAUS MB23 và kết quả đo độ ẩm bột dược liệu...............................................................................................................................39
vi
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô
DANH MỤC CÁC BẢNG VÀ SƠ ĐỒ Bảng 1: Hàm lượng tinh dầu lá tía tô thu hái tại hai thời điểm. ................................ 9 Bảng 2: Các chỉ tiêu hóa lý của tinh dầu lá tía tô. .................................................. 10 Bảng 3: Các thành phần bay hơi chính trong tinh dầu lá tía tô. .............................. 10 Bảng 4: Thành phần của các hợp chất polyphenol có nguồn gốc từ P.frutescens. . 16 Sơ đồ 1: Mô tả quy trình chiết xuất dịch chiết từ dược liệu lá Tía tô (Perilla frutescens (L.) Britt)....................................................................................................................30 Sơ đồ 2: Mô tả quy trình chiết tinh dầu lá tía tô (Perilla frutescens (L.) Britt) bằng phương pháp cất kéo theo hơi nước ................................................................. ........37
vii
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô
ĐẶT VẤN ĐỀ Hiện nay con người đang có xu hướng sử dụng thuốc có nguồn gốc từ thiên nhiên để hạn chế các tác dụng phụ hay gặp phải khi dùng thuốc tân dược. Việt Nam nằm trong vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa nóng ẩm, mưa nhiều, cây cối tươi tốt quanh năm, vốn nổi tiếng về nguồn dược liệu phong phú và đa dạng. Trong số hàng trăm loài cây thuộc họ Hoa môi (Lamiaceae) ở nước ta, tía tô là một trong những loài dược liệu đã được sử dụng từ rất lâu đời ở nước ta. Tía tô (Perilla frutescens (L.) Britt) hay còn được gọi là tử tô, tử tô tử, tô ngạnh, trong dân gian chúng được sử dụng rộng rãi trong trị cảm cúm, ho, giải độc, giúp tiêu hóa..v.v. Ngoài ra lá tía tô còn được dùng làm gia vị và rau ăn sống hàng ngày. Nhận thấy được giá trị tuyệt vời trong chữa bệnh và có nguồn nguyên liệu phong phú, rẻ tiền. Các nhà khoa học đã có nhiều công trình nghiên cứu về tác dụng dược lý của lá tía tô nhằm ứng dụng vào nền y học nước nhà. Từ đó cho thấy tía tô là loài cây có tiềm năng phát triển mạnh mẽ và có giá trị ứng dụng cao trong nền y học hiện đại. Tuy nhiên, vấn đề về việc phát triển rộng rãi và xây dựng một tiêu chuẩn chất lượng cho cây tía tô tại nước ta chưa được xem trọng. Thêm vào đó, điều kiện trồng trọt ở mỗi vùng miền khác nhau sẽ cho giá trị dinh dưỡng khác nhau. Từ những vấn đề trên việc xây dựng một tiêu chuẩn chất lượng cho cây tía tô tại mỗi vùng miền là thật sự cần thiết. Trong đề tài này tôi chọn cây tía tô tại ấp Hòa Khánh, xã Hòa An, thành phố Cao Lãnh, tỉnh Đồng Tháp để làm đối tượng nghiên cứu. Mục tiêu của đề tài này là mô tả tổng quan về cây tía tô, đặc điểm vi học và vi hóa của lá tía tô. Từ đó xây dựng được một tiêu chuẩn dược liệu về lá tía tô để bổ sung vào Dược điển Việt Nam IV nhằm nâng cao công tác kiểm nghiệm và chất lượng của dược liệu, góp phần đảm bảo sức khỏe cho người sử dụng.
1
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô
CHƯƠNG I TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 1
Tổng quan về thực vật học
1.1 Tên gọi -
Tên khác: tử tô, tử tô tử, tô ngạnh.
-
Tên khoa học: Perilla frutescens (L.) Britt thuộc họ Hoa môi (Lamiaceae).
-
Tên đồng nghĩa: Ocimum frutescens L., Perilla ocymoides L., Melissa cretica auct. non L.: Lour., Mentha perilloides auct. non L.: Lamk.
-
Tên nước ngoài: Perilla, Purple common perrilla (Anh), Pérille (Pháp), ‘zisu’ (Trung Quốc), ‘shiso’ (Nhật Bản), ‘deulkkae’ (Hàn Quốc), ‘khao poon’ (Lào).[2, 17, 18, 19]
1.2 Nguồn gốc xuất xứ -
Họ Hoa môi hay họ Húng, họ Bạc Hà (Lamiaceae hay Labiatae) có khoảng 263 chi với khoảng 6.900 – 7.173 loài.
-
Nguồn gốc bản địa của Chi tía tô (Perilla) trải rộng từ Ấn Độ đến Đông Nam Á.
-
Loài cây Tía tô (Perilla frutescens) được xác định có nguồn gốc ở vùng núi Himalayas đến vùng Đông Nam Á. Ở Trung Quốc cây tía tô được trồng ít nhất 500 năm trước Công nguyên. Ở Nhật Bản cây tía tô được trồng vào khoảng từ thế kỷ thứ 7 – 9 sau Công nguyên. Loài cây được du nhập vào Mỹ để trồng làm cảnh và đã trở thành loài thực vật xâm lấn.
-
Đây là loài cây được trồng phổ biến ở Châu Á với nhiều thứ và dạng như sau: Perilla frutescens var. auriculato dentata. Perilla frutescens var. crispa (Đồng nghĩa Perilla frutescens thứ nankinensis, Perilla ocymoides thứ crispa) Perilla frutescens form crispidiscolor. Perilla frutescens var. laciniata (Đồng nghĩa Perilla laciniata).
2
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô Perilla frutescens var. purpurascens (Đồng nghĩa: Perilla ocymoides var. purpurascens). Perilla ocimoides form citriodora (Đồng nghĩa: Perilla citriodora). -
Trong đó quan trọng là các phân loài: Tía tô lá tím (P.frutescens var. crispa): gốc Trung Quốc và Nhật Bản. Tía tô lá xanh (P.frutescens var. frutescens): được gọi là mè hoang dại ở Hàn Quốc. Tía tô hai màu (P.frutescens var. crispa forma) là dạng lá phía trên màu xanh, phía dưới màu tím. Tía tô mép lá quăn (P.frutescens L. var. bicolorlaciniata) có giá trị sử dụng cao hơn.
-
Còn có loài tía tô lá quăn (Perilla ocymoides L. var. bicolorlaciniata) có giá trị sử dụng cao hơn.
-
Cần phân biệt với thứ tía tô có lá màu tím hung là Perilla ocymoides var. purpurascens, không có mùi thơm của tía tô.[2, 17, 18, 19]
1.3 Phân loại Vị trí cây Tía tô (Perilla frutescens (L.) Britt) trong hệ thống phân loại thực vật [17]: Ngành ngọc lan (Magnoliophyta) Lớp ngọc lan (Magnoliopsida)
Phân lớp hoa môi (Lamiidae)
Bộ hoa môi (Lamiales)
Họ hoa môi (Lamiaceae)
Chi (Perilla) 3
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô 1.4 Đặc điểm hình thái -
Mô tả chung: cây thân thảo, cao 0.5 – 1 m, mọc đứng, phân nhánh nhiều, có rãnh dọc, toàn cây có mùi thơm và có nhiều lông.[6]
1.4.1 Thân -
Thân và cành vuông, lõm ở cạnh, màu xanh hay tím, có nhiều lông.[3, 6]
Hình 1:Thân và cành vuông, có nhiều lông (thực tế). 1.4.2 Lá -
Lá đơn, mọc đối chéo chữ thập, phiến mỏng, hình trứng rộng, kích thước 7-13 x 59 cm, đỉnh lá nhọn, gốc tròn, mép lá có răng cưa nhọn, hai mặt lá có màu xanh hoặc tím nhạt; những lá ở ngọn thường có màu tím mặt trên, khi lá già mặt lá trở thành màu xanh; gân ở giữa có màu tím, gân bên 6 – 8 đôi. Cuống lá dạng sợi, dài 2 – 5 cm, đường kính 1,5 – 2 mm, màu tím xanh. [3], [17].
4
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô
Hình 2: Cấu tạo mặt trên và mặt dưới lá tía tô
Hình 3:Chiều dài và chiều rộng lá tía tô
Hình 4: Chiều dài cuống lá và lá mọc đối chéo chữ thập.
5
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô 1.4.3 Hoa -
Cụm hoa dạng chùm ở ngọn cành hoặc nách lá, dài 5 – 20 cm, mỗi đốt mang 2 hoa mọc đối hình chữ thập.
-
Hoa không đều, lưỡng tính, mẫu 5. Lá bắc hình trứng rộng, dài hơn hoa, đầu nhọn, kích thước 2,5-3 x 3 cm, màu xanh, có lông dài, tồn tại đến khi hoa thành quả. Cuống hoa dài 1 – 3 mm. Đài hình chuông, màu xanh cỡ 3-4 x 2-3 mm, có 10 gân dọc, có vòng lông trắng dài ở họng, 2 môi: môi trên 3 thùy ngắn; môi dưới 2 thùy nhọn xẻ sâu và dài hơn môi trên, đài tồn tại và phát triển đến khi quả đã khô và rụng, có kích thước 5-8 x 3-4 mm.
Hình 5: Hoa không đều, mẫu 5 và có lá bắc hình trứng, đầu nhọn.
Hình 6: Cụm hoa mọc ở ngọn hoặc ở nách lá.
6
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô
Hình 7: Hoa mọc đối chéo hình chữ thập -
Tràng hợp thành ống màu trắng, dài 3 – 4 mm ở phía dưới, có vòng lông ở họng, 2 môi 2/3: môi trên chia 2 thùy cạn; môi dưới có thùy giữa lớn hơn 2 thùy bên. Nhị 4, đính ở 1/3 phía trên ống tràng; xen kẽ với cánh hoa, không nhô hẳn ra ngoài, 2 nhị dưới dài hơn 2 nhị trên. Chỉ nhị dạng sợi, bao phấn màu tím, 2 ô song song, nứt dọc, hướng trong, đính đáy. Hạt phấn gần như hình cầu, nhiều rãnh ngoằn ngoèo, đường kính 40 – 45 µm.
-
Lá noãn 2, bầu 2 ô sau có vách giả chia thành 4 ô, mỗi ô 1 noãn, đính đáy. Bầu noãn đường kính 2 mm, hình vuông, góc tròn. Ở một số bầu noãn có khi chỉ 2 hoặc 3 noãn phát triển thành quả, các noãn còn lại không phát triển. Vòi nhụy dạng sợi dài 2 – 2,5 mm, nửa dưới màu trắng, nửa trên màu tím nhạt, 2 đầu nhụy thò ra ngoài.[17]
Hình 8: Hoa thức và hoa đồ cây tía tô
1.4.4 Quả -
Quả bế tư, hình trứng hoặc gần hình cầu, gốc quả hơi nhọn, gồm 4 hạch nhỏ, mỗi hạch chứa 1 hạt. Khi chưa chín màu trắng ngà, đường kính mỗi quả khoảng 1 – 1,5 mm, cả “tứ bế quả” khoảng 3 mm. Lúc chín, quả khô lại và có màu nâu đen, có vân mạng lưới, dễ dàng rơi ra khỏi đài từng quả riêng rẽ. Vỏ quả mỏng, giòn, dễ vỡ. Hạt có mùi thơm nhẹ khi vỡ, vị cay.[17]
7
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô
Hình 9: Cấu tạo quả tía tô 1.5 Phân bố, sinh thái và thu hái -
Trên thế giới chi Perilla L. có một số loài ở châu Á. Nguồn gốc có thể từ vùng núi của Ấn Độ và Trung Quốc, sau được nhân giống trồng khắp nơi ở châu lục. Cây cũng được trồng ở vùng có khí hậu ôn hòa của Châu Âu. Ở Mỹ và Ukraina còn thấy cây mọc trong trạng thái hoang dại (PROSEA; 1999. No 13 – spice; 166 – 170).[6]
-
Tại Việt Nam tía tô được trồng ở khắp nơi để làm rau gia vị và làm thuốc.
-
Cây ưa sáng và ẩm, thích hợp với đất phù sa. Tía tô ra hoa cho quả nhiều, sau khi quả già, cây tàn lụi, hạt giống phát tán ra xung quanh, đến mùa mưa ẩm năm sau mới nảy mầm. Cây được trồng bằng hạt, chọn những cây to khỏe không sâu bệnh, gieo vào tháng 1 – 2. Vào tháng 3 – 4 có thể thu hái lá lần thứ nhất, sau đó khoảng 1 tháng, có thể thu hái lứa thứ hai. Sau lần hái đầu tiên, cần chăm sóc bằng cách tưới nước tiểu pha loãng hoặc dùng khô dầu giã nhỏ bón vào gốc. Mỗi cây có thể thu hái 2 – 3 lần lá. Khi thu hái lá, cành về phải phơi trong mát hay sấy nhẹ để giữ hương vị.[1, 2]
8
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô Bảng 1: Hàm lượng tinh dầu lá tía tô thu hái tại hai thời điểm [7]. Độ ẩm
Hàm lượng tinh dầu
(%)
(% chất khô)
Chuẩn bị ra hoa
82,00
0,76
Ra hoa rộ
80,66
0,67
Thời điểm thu hái
1.6 Bộ phận dùng -
Tử tô tử (tô tử, hắc tô tử - Fructus Perillae) là quả chín phơi hay sấy khô của cây tía tô.
-
Tử tô (Herba Perillae) là cành non có mang lá của cây tía tô phơi hay sấy khô.
-
Tử tô diệp (Folium Perillae) là lá phơi hay sấy khô.
-
Tô ngạnh (tử tô ngạnh – Caulis Perillae) là cành non hoặc cành già phơi hay sấy khô.[1]
1.7 Thành phần hóa học trong lá Tía tô -
Lá tía tô chứa 0,3 – 1,3% lượng tinh dầu theo chất khô. Tinh dầu trong lá tía tô có hơn 30 hợp chất đã được xác định, trong đó thành phần bay hơi có 4 loại chính là monoterpene, sesquiterbene, phenylpropanoid và furylketone. Theo Đỗ Tất Lợi (2003) và Yu et al. (2010), loại tinh dầu này chứa thành phần chủ yếu là perilla aldehyde, limonene, α-pinene, β-caryophyllene, linalool và perilla alcohol,...Trong đó, dẫn xuất của perilla aldehyde có tên là perillartine. Chất này có vị ngọt gấp 2.000 lần đường mía và có calo rất thấp.
-
Chất màu trong lá tía tô là do este của chất xyanin clorit C27H31O16Cl. Ngoài các chất trên, trong tía tô còn chứa adenin C5H5N5 và acginin C6H14N4O2.[7]
9
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô Bảng 2: Các chỉ tiêu hóa lý của tinh dầu lá tía tô [7]. Các chỉ tiêu hóa lý Tỷ trọng d20 20 Chỉ số khúc xạ, nD20 Chỉ số acid (mg KOH/g) Đánh giá cảm quan
Kết quả 0,941 1,496 0,94 Màu vàng sáng, vị cay, hương đặc trưng
Bảng 3: Các thành phần bay hơi chính trong tinh dầu lá tía tô [7]. Thời gian lưu
Hàm lượng (%)
STT
Thành phần
1
Hexenal
4,11
0,49
2
Hex-3-en-1-ol
4,14
0,71
3
Α-pinene
5,81
0,17
4
Benzaldehyde
6,43
2,04
5
Octen-3-ol
6,85
1,80
6
Octanol
7,30
0,22
7
Limonene
8,32
5,95
8
Benzyl alcohol
8,41
0,30
9
Benzenea cetaldehyde
8,74
0,52
10
Linalool
10,74
2,32
11
Phenyl ethyl alcohol
10,90
0,26
12
Unknow (93, 154, RI, 1282)
16,16
4,91
13
Perilla aldehyde
16,34
37,38
14
Perila alcohol
17,02
0,88
15
Eugenol
18,93
1,66
16
Α-copaene
19,58
0,30
17
Caryophylene
20,97
5,55
18
Humulene
22,03
0,84
(phút)
10
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô 19
Muurolene
22,86
1,59
20
Zingiberene
23,21
2,38
21
Myristicine
24,09
26,39
22
Unknow (32, 278, RI, 2125)
39,25
0,66
Total
97,32
1.8 Tác dụng dược lý của lá Tía tô 1.8.1 Tác dụng ức chế vi khuẩn -
Các hợp chất perilla aldehyde, phenylpropanoid và β-caryophyllene trong tinh dầu lá tía tô có tác dụng ức chế các loại vi khuẩn gây ngộ độc thực phẩm như: Sallmonella, tụ cầu khuẩn, trực khuẩn lị, trực khuẩn đại tràng....[7, 9]
1.8.2 Tác dụng chống oxy hóa -
Trong nghiên cứu các chất chiết xuất từ lá tía tô, các hợp chất polyphenolic có hoạt tính chống oxy hóa. Trong đó, các dẫn xuất acid cinnamic (acid coumaroyl tartaric, acid caffeic và acid rosmarinic), flavonoid (apigenin 7-O-caffeoylglucoside, scutellarein 7-O-digglucuronit, luteolin 7-O-diglucuronit, apigenin 7-O-diglucuronide, luteolin 7-O-glucuronit và scutellarein 7-O-glucuronid) và các anthocyanins ( chủ yếu là cis-shisonin, shisonin, malonylshisonin và cyanidin 3-O-(E)-cafloylglucoside-5-Omalonylglucoside) được định lượng và hoạt tính chống oxy hóa dựa trên sự ức chế của gốc tự do 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH). Những kết quả này có tương quan cao trong một số hợp chất polyphenolic o-dihydroxylated và sự chống oxy hóa.[13]
1.8.3 Tác dụng chống ung thư -
Theo Ripple et al. (2004), perilla alcohol và limonene có tác dụng ức chế sự tăng trưởng của các khối u vú, khối u gan, ung thư phổi ở chuột.
-
Trong nghiên cứu về tác dụng ức chế của cao tía tô và những thành phần phenolic trên sự tăng sinh tế bào màng nâng cuộn mao mạch nuôi cấy của chuột gây bởi cytokin, đã nhận xét thấy cao tía tô ức chế sự tổng hợp DNA của tế bào màng nâng cuộn mao mạch được kích thích bởi yếu tố sinh trưởng từ tiểu cầu 10 mg/ml, hoặc yếu tố hoại tử khối u – α (100 U/ml). Các thành phần hoạt chất được phân lập từ 11
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô cao tía tô là acid caffeic, methyl caffeat, acid rosmarinic và lutein-7-O-glucuronid6-methyl ester. Trong các flavonoid phân lập từ tía tô, luteolin có hoạt tính chống tăng sinh mạnh nhất.[6] 1.8.4 Tác dụng kháng nấm -
Dịch chiết methanol có tác dụng kháng nấm Candida albicans. Một hoạt chất kháng khuẩn và kháng nấm là perillaldehyde citral.
1.8.5 Tác dụng điều vị -
Trong thành phần tinh dầu lá tía tô có chứa một dẫn xuất của perilla aldehyde có tên là perillartine, chất này có vị ngọt gấp 2.000 lần đường mía và có calo rất thấp. Nó được sử dụng là chất tạo ngọt thay thế. Đặc biệt, đây còn là phụ gia quan trọng trong ngành sản xuất thuốc lá để giảm mùi hăng cay.[1]
1.8.6 Tác dụng kháng viêm và chống dị ứng -
Tác dụng kháng viêm và chống dị ứng của luteolin có trong các loài Perilla được nghiên cứu trên các mô hình dị ứng thực nghiệm trên động vật gậm nhấm. Luteolin ức chế phản ứng da gồm hai giai đoạn (giai đoạn phản ứng tức thì và giai đoạn phản ứng chậm), trung gian bởi kháng thể IgE ở chuột nhắt trắng. Tuy vậy, luteolin không ảnh hưởng đến phản ứng da gây bởi yếu tố hoạt hóa tiểu cầu. Trong một nghiên cứu in vitro, luteolin ức chế sự giải phóng histamin trung gian bởi IgE từ dưỡng bào tủy xương và dưỡng bào phúc mạc chuột cống trắng nuôi cấy. Luteolin cũng ức chế sự sản sinh TNF – α (yếu tố hoại tử khối u – α) và IL 6 (interleukin – 6) từ dưỡng bào tủy xương chuột cống trắng nuôi cấy.[6, 11]
- Trong một nghiên cứu khác, các nhà khoa học nhận thấy rằng chiết xuất Perilla frutescens giàu rosmarinic acid (RA), các hợp chất polyphenolic có khả năng ức chế đáp ứng miễn dịch dị ứng và viêm do bạch cầu đa nhân hạt (polymorphonuclear leukocytes - PMNL) ở chuột. Tuy nhiên, một vài thử nghiệm lâm sàng có đối chứng giả dược đã kiểm tra tính hiệu quả và an toàn của hợp chất polyphenolic phytochemicals để điều trị các bệnh viêm dị ứng ở người. Nghiên cứu xác định việc bổ sung đường uống của acid rosmarinic là một can thiệp hiệu quả cho bệnh nhân bị viêm giác mạc do dị ứng theo mùa (seasonal allergic rhinoconjunctivitis - SAR). Trong nghiên cứu này, bệnh nhân được điều trị với RA
12
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô hoặc giả dược trong 21 ngày. Bệnh nhân được ghi lại các triệu chứng hàng ngày, đo nồng độ eotaxin, IL-1β, IL-8 và histamin trong dịch mũi, nồng độ IgE huyết thanh và xét nghiệm máu cũng được kiểm tra. So với việc bổ sung giả dược, bổ sung RA làm giảm đáng kể số lượng bạch cầu trung tính và bạch cầu ái toan trong dịch mũi (P