Practica N°11 Hemosporinos 2 PDF [PDF]

Zitiervorschau

PRÁCTIC A N°11

HEMOSPORINOS

OBJETIVO GENERAL

• El alumno estudiará la morfología, ciclo de vida, la patología y el diagnóstico del género Plasmodium.

OBJETIVOS CONDUCTUALES

• 1. Describirá las características morfológicas de las fases del cíclo de vida, utilizando el modelo de paludismo murino.

• 2. Describirá las características diagnosticas de las fases eritrocíticas de las tres especies más importantes que parasitan al hombre. • 3. Evaluara las alteraciones hematológicas y viscerales importantes en la patología del paludismo. • 4. Practicara dos técnicas de diagnóstico parasitoscópico.

Gametocitos en sangre ingerida.

Exflagelación.

Oocineto (Después de la fertilización).

Formación de los Oosquistes detrás de la mucosa estomacal.

Salida de los esporozoítos liberados de los ooquistes.

Diferencias morfológicas de Plasmodium en sangre periférica Plasmodium falciparum 1. ERITROCITO PARASITADO: -

Eritrocitos de todas las edades. Morfología ER parasitado normal. (1a ) Infección múltiple frecuente.(1b) Granulaciones de Maurer. (1d)

2. TROFOZOÍTOS: - Anulares con dos manchas de cromatina. (1c) - Ocupan 1/6 parte del volumen del ER. - Algunos periféricos. (1c)

1b

Diferencias morfológicas de Plasmodium en sangre periférica Plasmodium falciparum

3. ESQUIZONTES:

- Pigmento malárico. - Originan 12-24 merozoítos. - No se observan en circulación periférica. 4. GAMETOCITOS: - Forma semiluna “salchicha”. - Pigmento malárico. Macrogametos(3b): -Citoplasma azul oscuro. -Masa de la cromatina roja oscura concentrada. -Gránulos de pigmento concentrado. Microgameto (3c): - Citoplasma azul más claro. - Cromatina roja más clara. - Distribución difusa de los granulos de pigmento.

Diferencias morfológicas de Plasmodium en sangre periférica Plasmodium malariae 1. ERITROCITO PARASITADO: - Eritrocitos viejos. - Morfología ER parasitado normal. - Granulaciones de Ziemann

2. TROFOZOÍTOS: - Jóvenes: Formas anilladas y en banda. (1e, 1f) - Adultos: Formas grandes y en banda. - Anillos grandes con un cúmulo de cromatina. (1a) - A veces la cromatina se encuentra en el centro de la vacuola “ ojo de pájaro”. (1c) - A veces los trofozoítos en crecimiento pueden presentar una vacuola que lleva el aspecto característico “ en canasta”. (1g).

Diferencias morfológicas de Plasmodium en sangre periférica Plasmodium malariae

3. ESQUIZONTES:

- Formas en roseta/margarita. (2b) - Los esquizontes inmaduros 4 segmentos en forma irregular. (2a) - Pigmento malárico. - Originan 8-12 merozoítos. 4. GAMETOCITOS: - Grandes, esféricos. - Granulaciones abundantes. Microgametos (3a): - Redondondos, ovales, llenan en su totalidad a los ER. - Citoplasma azul pálido. - Cromatina mal definida. - Gránulos de pigmento distribuidos en todo el citoplasma. Macrogamentos (3b): - Citoplasma más azul. - Cromatina nuclear más pequeña, color rosado.

Diferencias morfológicas de Plasmodium en sangre periférica Plasmodium vivax 1. ERITROCITO PARASITADO: -

Eritrocitos jóvenes y Reticulocitos. Hipertrofía de los ER parasitados. (1d) Granulaciones de Schüffner. (1d) Infección múltiple poco común.

2. TROFOZOÍTOS: - Jóvenes: grandes con forma anillada.(1a) - Adultos: Formas grandes ameboides y ocupan 2/3 partes del ER. (1c) - Anulares. - Trofozoítos viejos son más grandes y ameboides, cromatina abundante, citoplasma con grandes cantidades de pigmento. (1e)

Diferencias morfológicas de Plasmodium en sangre periférica Plasmodium vivax

3. ESQUIZONTES: - Grandes ameboides/amorfos. (2a) - Pigmento malárico. - Originan 12-24 merozoítos. (2b)

4. GAMETOCITOS: - Grandes, esféricos. - Pigmento malárico abundante. - Granulaciones abundante. Microgametos (3b): - Citoplasma azul claro a rosado. - Cromatina color rojo claro o rosado masa grande y difusa. Macrogamentos (3a): - Grandes - Citoplasma de color azul. - Masa de cromatina roja compacta, excéntrica. - Vacuolas ausentes.

Diferencias morfológicas de Plasmodium en sangre periférica Plasmodium ovale 1. ERITROCITO PARASITADO: -

Eritrocitos jóvenes. Células hipertorfiadas, irregulares, ovaladas. (1b) Granulaciones de Shüffner abundantes. (1b) Infecciones múltiples son comunes. (1c)

2. TROFOZOÍTOS: - Jóvenes: Formas anilladas y ovaldas. (1a) - Adultos: Formas grandes, avalados e irregulares.

Diferencias morfológicas de Plasmodium en sangre periférica Plasmodium ovale 3. ESQUIZONTES: - Irregulares en varios estadios de segmentación. (2a). - Pigmento malárico. - Originan 8 – 12 merozoítos. (2b) 4. GAMETOCITOS: Microgametos (3b): - Cromatina difusa de color rosado. - Citoplasma azul claro. Macrogamentos (3a): - Gran tamaño. - Citoplasma se tiñe de varias gamas de azul. - Cromatina compacta de color rojo a rosado.

Plasmodium chabaudi

- Presenta una similitud con P. falciparum al infectar eritrocitos normales y reticulocitos. - Es un parásito utilizado como un buen modelo de estudio debido a que comparte una alta homología ( estructural, bioquímica, cíclo de vida) con plasmodios que infectan al hombre.

- Es una de las cuatro especies que producen la malaria en roedores africanos: 1) P. chabaudi 1940 -1960. 2) P. berghei 1948. 3) P. vinckei 1952. 4) P. yoelii 1966.

Vector: Anopheles stephensi.

Hospedero: Thamnomys rutilans

VECTOR

Dípteros del genero Anopheles

- Se han descrito 460 especies, de las cuales 100 transmiten la malaria. -

Se encuentran en todo el mundo a excepción de los polos. Principalmente en los climas tropicales. Las hembras son transmisoras. Los anofelinos hembras se pueden diferenciar por su postura al momento de alimentarse.

- Especies principales en México. Anopheles albimanus. Anopheles pseudopunctipennis. - Especie principal en África

Anopheles gambiae.

DISCUSIÓN PRACTICA N°11 HEMOSPORINOS

RESULTADOS PRIMERA SESIÓN Orden de protozoarios de la clase de los esporozoos, que viven en los hematíes de los vertebrados homotermos, donde se reproducen asexualmente; son transmitidos de un animal a otro por medio de insectos, en cuyo interior tiene lugar la fecundación y la esporulación. • Tienen ciclos de vida que alternan entre un huésped artrópodo y uno vertebrado. * Babesia no inverte • Los trofozoitos parasitan eritrocitos u otros tejidos del hospedador vertebrado. Babesia solo eritrocitos • Los microgametos y macrogametos siempre se encuentran en la sangre. * babesia maduran en raton • El oocineto que penetra en el cuerpo del vector y se convierte en ooquiste en el cual existe la formación de esporozoitos los cuales se liberan del ooquiste y migran a las glándulas salivales del vector, Babesia oocineto penetra a glándulas salivales.

RESULTADOS DE LA PRIMERA SESIÓN.

3. INOCULACIÓN DE RATONES LIMPIOS 106 GRP. a) SUSPENSIÓN DE GR

1:10

Alícuota de 10 µL

4-8 gotas de sangre por cada mL solución Sangre de la vena caudal del ratón parasitado

Diluciones, llenar la cámara de NB

1:100

1-2 mL de SSI, 0.85%

Diluciones

Determinar la concentración de GR por mL.

3. INOCULACIÓN DE RATONES LIMPIOS 106 GRP. b) DETERMINACIÓN DEL # GR POR mL. a) # GR por mL = ( ΣGR presentes en 5 campos) ( 5 ) (10 000) b) Multiplicar el resultado anterior por el FD correspondiente. 1.0 mm

1.0 mm

Volumen CNB = (0.1mm)(0.1mm) * (0.1mm) 1mm3 = 0.001 mL

3. INOCULACIÓN DE RATONES LIMPIOS 106 GRP. c) PREPARACIÓN DEL INÓCULO 1) # GR por mL.

2) Factor de corrección para determinar el #GRP a partir del % GRP calculado a partir de la lectura del FSP. 3) Calcular el FD Plasmodium chabaudi : suspensión 106 GRP. Plasmodium berghei : suspensión 105 GRP.

4) Inocular a los ratones vía IP y marcar.

RESULTADOS DE LA PRIMERA SESIÓN. RATÓN LIBRE DE INFECCIÓN.

RATÓN INFECTADO

Hb

CONC. DE Hb

HEMATOCRITO

ABS

(mg/dL)

(%)

5

0.522

18.80

55.3

3

66.0

COLA

1

0.422

14.76

50.0

19

45.0

LOMO

3

0.320

11.52

60.0

19

41.0

PATA DELANTERA DER.

8

0.343

12.35

70.0

18

52.0

PATA DELANTERA IZQ.

4

0.462

16.63

55.3

18

40.0

PATA INFERIOR DER.

6

0.450

16.21

55.5

18

48.0

PATA INFERIOR IZQ.

7

0.499

17.97

61.9

3

49.0

MARCA DE RATÓN

No. EQUIPO

CABEZA

CONCENTRACIÓN PATRÓN: 19.7 g/dL ABS: 0.547

VALORES REPORTADOS Hb: 10 – 20 mg/dL. Hto: 35 – 45 %

No. RATÓN PARASIT

GRP (%)

RESULTADOS SEGUNDA SESIÓN

RESULTADOS DE LA SEGUNDA SESIÓN. RATÓN LIBRE DE INFECCIÓN.

RATÓN POST-INFECTADO

Hb

CONC. DE Hb

HEMATOCRITO

Hb

CONC. DE Hb

HEMATOCRITO

GRP

ABS

(mg/dL)

(%)

ABS

(mg/dL)

(%)

(%)

5

0.522

18.80

55.3

0.471

17.0

51.0

POSITIVO*

COLA

1

0.422

14.76

50.0

1.639

57.35 (59.1)

61.5

NEGATIVO

LOMO

3

0.320

11.52

60.0

0.189

6.8

47.9

NEGATIVO

PATA DELANTERA DER.

8

0.343

12.35

70.0

0.330

11.9

52.6

NEGATIVO

PATA DELANTERA IZQ.

4

0.462

16.63

55.3

0.430

15.5

51

NEGATIVO

PATA INFERIOR DER.

6

0.450

16.21

55.5

0.231

8.3

54

NEGATIVO

PATA INFERIOR IZQ.

7

0.499

17.97

61.9

0.466

16.8

60

NEGATIVO

MARCA DE RATÓN

No. EQUIPO

CABEZA

CONCENTRACIÓN PATRÓN: 19.7 g/dL ABS: 0.547

* INFECCIÓN TEMPRANA.

RESULTADOS DE LA SEGUNDA SESIÓN.

RESULTADOS DE LA SEGUNDA SESIÓN.

Ooquistes Plasodium vivax. 10x

Ooquistes Plasodium sp. 10x

Esporozoitos P. gallinaceum 100x

Trofozoito en Banda P. malariae 100x

RESULTADOS DE LA SEGUNDA SESIÓN.

Microgameto P. falciparum 100x

Trofozoito P. falciparum 100x Esquizonte P. malariae 100x

Diferencias morfológicas de Plasmodium en sangre periférica Plasmodium malariae

3. ESQUIZONTES:

- Formas en roseta/margarita. (2b) - Los esquizontes inmaduros 4 segmentos en forma irregular. (2a) - Pigmento malárico. - Originan 8-12 merozoítos. 4. GAMETOCITOS: - Grandes, esféricos. - Granulaciones abundantes. Microgametos (3a): - Redondondos, ovales, llenan en su totalidad a los ER. - Citoplasma azul pálido. - Cromatina mal definida. - Gránulos de pigmento distribuidos en todo el citoplasma. Macrogamentos (3b): - Citoplasma más azul. - Cromatina nuclear más pequeña, color rosado.

Trofozoitos y Esquizonte P. berghei 100x

Trofozoitos y Esquizonte P. chabaudi 100x

RESULTADOS DE LA SEGUNDA SESIÓN.

REFERENCIAS

-Botero D; Restrepo M; Parasitosis Humanas. Editorial CIB. 5ª Edición. Medellín Colombia 2012. -Ash, Lawrence R; Atlas de parasitología humana. Editorial Medica Panamericana 5ª Edición.