Immuno Logie [PDF]

Zitiervorschau

Immunologie

Ces résumés de synthèse ont été élaborés à partir de PrepECN, Mikbook, le KB, les recommandations du Collège des Enseignants (France) et les cours des professeurs. J’ai aussi essayé de compléter par des informations que j’ai trouvé sur Siamois QCM qui m’a été d’une grande utili. Par Dr. Abdeslam Bendaas Résident en Ophtalmologie

Tous les droits sont réservés pour Siamois QCM®

Table des matières Généralités ....................................................................................................... 1 I- Les deux types d’immunité : ............................................................................ 1 II- Les organes lymphoïdes ................................................................................... 3 Les Antigènes ................................................................................................... 8 I- Définition et propriétés :.................................................................................... 8 II- Différents types d’antigènes : ........................................................................ 8 1- Selon l’immunogénicité ................................................................................. 8 2- Selon l’origine : ............................................................................................... 11 III- Facteurs influençant l’immunogénicité : ............................................. 11 Les composants de l’immunité innée .................................................. 14 1- Les macrophages : ......................................................................................... 14 2- Marqueurs de surface : ............................................................................... 15 3- Molécules produites : .................................................................................. 15 II- Fonctions : ............................................................................................................ 16 1- Phagocytose : ................................................................................................... 16 2- -Formation de phagolysosome ............................................................... 16 III- Cellules dendritiques myéloïdes (conventionnelles) : .................. 17 1- Molécules de surface : ................................................................................. 17 2- Fonctions :......................................................................................................... 18 IV- Présentation de I' Ag aux LT ...................................................................... 19 V- Extravasation des leucocytes ou la diapédèse : .................................. 20 VI- Les Lymphocytes Natural Killers (NK) ................................................. 21 Déroulement de la réponse immunitaire innée .............................. 25 Le système du complément ..................................................................... 28 I- Définition : ............................................................................................................. 28 II- Nomenclature :................................................................................................... 28 III- Mécanismes d’activation du complément : ......................................... 29 IV- Contrôle de l’activation de la voie du complément : ...................... 31 V- Rôles du complément : ................................................................................... 31 VI- Les déficits en complément : ...................................................................... 33

VII- Déficits acquis : ............................................................................................... 35 VIII- Exploration du système de complément : ........................................ 35 1- Démarche diagnostique : ........................................................................... 36 Les Lymphocytes T ..................................................................................... 38 I- ONTOGENESE DES LYMPHOCYTES T....................................................... 38 II- ETAPES DE MATURATION DIEFERENCIATION DES LT ................ 38 III- LE PHENOTYPE DES LYMPHOCYTES T (AU REPOS):.................... 39 IV- LES SOUS POPULATIONS LYMPHOCYTAIRES T: ............................. 41 CMH et implication en clinique .............................................................. 44 I- Transplantation d’organes : .......................................................................... 44 1- Mécanismes de la réponse immune à l'allogreffe : ....................... 44 2- Action effectrice des LT cytotoxiques (LTc) : .................................. 46 3- Action effectrice des cellules NK : ......................................................... 46 4- Actions effectrices de l'inflammation : ................................................ 46 5- Rôle des anticorps : ...................................................................................... 46 II- Exploration .......................................................................................................... 49 Le système HLA ............................................................................................ 51 I- CMH ........................................................................................................................... 51 II- STRUCTURE GENERALE DU COMPLEXE HLA : .................................. 51 III- CARACTERISTIQUES DES GENES HLA : ............................................... 52 IV- ORGANISATION GENETIQUE ET STRUCTURE MOLECULAIRE : ......................................................................................................................................... 52 V- DISTRIBUTION TISSULAIRE DES MOLECULES HLA........................ 53 VI- ASSOCIATION HLA ET MALADIES : ........................................................ 54 Cytokines et chimiokines ......................................................................... 55 I- Les Cytokines : ..................................................................................................... 55 1- Nomenclature : ............................................................................................... 55 II- Sources cellulaires de cytokines au cours de la réponse immunitaire et la polarisation TH1/TH2/TH17 : ................................... 56 1- Classification fonctionnelle des cytokines ........................................ 57

2- LES CYTOKINE INFLAMMATOIRES ET ANTIINFLAMMATOIRES : .......................................................................................... 59 Les molécules d’adhésion ........................................................................ 61 Réactions de précipitation et d’agglutination .................................. 64 I- Les anticorps utilisables : ............................................................................... 64 II- LES REACTIONS DE PRECIPITATION : ................................................... 65 III- Les Techniques d’immuno-précipitation qualitatives .................. 65 IV- LES REACTIONS D’AGGLUTINATION : .................................................. 67 Techniques utilisant un marqueur ....................................................... 71 Hypersensibilité type I .............................................................................. 76 I- Généralités : .......................................................................................................... 76 II- La réaction d’hypersensibilité de type I ................................................ 77 III- Notion d’atopie : .............................................................................................. 77 IV- Composants de la réaction d’hypersensibilité de type I : ............ 77 V- Mécanismes de l’hypersensibilité de type I : ....................................... 79 VI- Conséquences des réactions d’hypersensibilité de type I : ......... 80 VII- Exploration de l’état d’hypersensibilité de type I .......................... 81 CYTOTOXIQUE .............................................................................................. 83 Hypersensibilité type III ........................................................................... 87 I- LES COMPLEXES IMMUNS : ........................................................................... 87 1- La formation des complexes immuns : ............................................... 87 2- Le devenir des complexes immuns en physiologie ....................... 87 Hypersensibilité type IV ........................................................................... 93 I- HYPERSENSIBILITE DE CONTACT : .......................................................... 93 1- Evolution : (24 - 72 h) : ............................................................................... 94 II- HYPERSENSIBILITE TUBERCULINIQUE................................................ 94 III- HYPERSENSIBILITE GRANULOMATEUSE .......................................... 95 Déficits immunitaires congénitaux ...................................................... 97 1- Infections récidivantes et sévères ......................................................... 97 2- Manifestations auto-immunes ................................................................ 98 3- Hypoplasie des organes lymphoïdes : ................................................. 98

4- Syndrome lympho-prolifératif ................................................................ 98 5- Autres signes ................................................................................................... 98 II- Classification ....................................................................................................... 98 1- Les déficits humoraux :............................................................................... 98 III- Déficits immunitaires combinés sévères :.........................................100 IV- Déficits immunitaires combinés syndromiques : ..........................101 1- WISCKOTT ALDRICH :...............................................................................101 2- Ataxie télangiectasie : ................................................................................102 3- Syndrome de Di George : .........................................................................102 V- Granulomatose aseptique : .........................................................................102 VI- Déficits immunitaires ciblés : ..................................................................102 VII- L’OEDEME ANGIONEUROTIQUE ..........................................................103 Les syndromes lympho-prolifératifs .................................................105 Le syndrome d’immunodéficience acquise .....................................107 I- Immunologie du VIH : ....................................................................................107 II- Cycle de réplication : .....................................................................................107 III- Des déficits d’expression en CCR5 ont été identifiés : .................108 IV- LES ANTICORPS : ...........................................................................................112 V- Indications thérapeutiques : ......................................................................113 1- Séroprophylaxie : ........................................................................................113 2- Sérothérapie : ................................................................................................114 VI- THERAPIE CELLULAIRE ............................................................................115 VII- IMMUNOTHERAPIE ANTI-ALLERGIQUE..........................................116 VIII- LES DIFFERENTS IMMUNOSUPPRESSEURS .................................116

Généralités ➔ Immunité : Discrimination du soi du non soi Peut être • Active : L’individu produit lui mm ses effecteurs • Passive : Transmission des effecteurs physiologiquement (grossesse) ou artificiellement (sérothérapie) • Adoptive : Transmission directe de cellules immunitaires

➔ La réponse immunitaire : l'activation des mécanismes du système immunitaire face à la reconnaissance de «non-soi», agressive ou pas. I-Les deux types d’immunité : L'immunité naturelle -native, innée ou naïve -Système facilement déjoué -Réponse immédiate, Non spécifique, non adaptative -Récepteurs invariants - repose sur une distinction globale du soi et du non-soi - toujours présente même chez l’individu sain - Ne peut pas attaquer le non-soi intracellulaire. ➔1er e ligne de défense comprend : a- Barrières : Physiques, Chimiques, Microbiologiques (flore intestinale) Mucus : contient des peptides antimicrobiens + IgA. b- Les tissus lymphoïdes associés aux muqueuses (MALT) : tissus lymphoïdes secondaires collectant les antigènes provenant du tractus respiratoire, gastrointestinal et urogénital.

Généralités

L'immunité acquise spécifique -spécifique de l'antigène qui l’a stimulée après invasion des tissus, adaptative -réponse retardée, mais plus efficace. -Système difficilement déjoué -Récepteurs hypervariables - limitée dans le temps à l'éradication de l'agresseur dont elle garde la mémoire -Diversité /expansion clonale / absence de réactivité contre le soi Assurée par les lymphocytes T et B: -Les lymphocytes T et les lymphocytes B ont une morphologie similaire avec un rapport nucléo cytoplasmique élevé. -Récepteur specifique a l’Ag : BCR ou TCR. -Les lymphocytes B le font sans intermédiaire (reconnaissance de l’antigène natif). - Les lymphocytes T ont besoin d’un intermédiaire : ont besoin que les antigènes leur soient présentés par une cellule présentatrice d'antigène CPA (reconnaissance d’un antigène apprêté).

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-Assurent la protection de plus de 400m² de muqueuses, ils sont en état de stimulation permanent Regroupent : plaques de Peyer, appendice, amygdales -Assurent une réponse humorale locale à IgA sécrétoires ➔On peut individualiser plusieurs systèmes : NASOPHARYNX : NALT Voies aériennes supérieures BALT Tube digestif : GALT (ce dernier contient à lui seul plus de cellules immunitaires que le reste de l’organisme) ➔Inflammation : cellules impliquées dont : - Les phagocytes « comprennent les PNN, histiocytes résidents (macrophages des tissus comme : les cellules alvéolaires du poumon ou les cellules de Küpffer du foie). La cellule microgliale est le macrophage du cerveau ». Les lymphocytes NK ➔ ROLE : -Natural killer des cellules tumorales ou infectées - sécrètent des cytokines, qui stimulent et orientent la réponse des lymphocytes B et T -Ils sont capables de lyser des cellules étrangères à l'organisme de manière indépendante de l'antigène et sans activation préalable. 3-Cytokines 4-Récepteurs (PRR dont TLR) 5-Complément

Généralités

Humoral Cellulaire Microbe extraC Phagocyté IntraC Lym B T .Helper T Répondeur .ctoxique Mécanism Anticorps Contact Contact Cellulaire Cellulaire Fonctions Neutralis Active les Tue les e les Ag macropha cellules extra C ges pour infectées phagocyte r 0

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II-Les organes lymphoïdes Les organes lymphoïdes primaires

➔Constitués par la MO et le thymus − Apparaissent tôt dans la vie embryonnaire avant les organes lymphoïdes secondaires. − Situés en dehors des voies de pénétration et de circulation des antigènes. - lieu de maturation des lymphocytes où ils acquièrent un récepteur propre à chaque cellule (constitution du répertoire) -c’est à leur niveau que les lymphocytes primaires acquièrent le répertoire de reconnaissance pour l’antigène. -Les lymphocytes y acquièrent : a- Des marqueurs spécifiques de lignée : ➔CD19 pour les lymphocytes B ➔CD3 pour les lymphocytes T b- Récepteur de spécificité propre à chaque cellule (BCR ou TCR) NB : Le BCR est uniquement exprimé par les LB - les progéniteurs lymphoïdes quitteront la moelle : pour gagner le thymus dans le cas des lymphocytes T -au contraire persisteront dans la moelle pour se différencier en lymphocytes B ou NK (Natural Généralités

Les organes lymphoïdes secondaires -leur développement est plus tardif que celui des OLPs -Sont situés sur les voies de pénétration des antigènes. -le lieu de la réponse immunitaire spécifique. -Sont peuplés des cellules issues des organes lymphoïdes primaires. -A ce niveau, on trouve : ➔la présentation et la reconnaissance des antigènes ➔l'activation et la prolifération des lymphocytes aboutissant à une orientation (ou) de la réponse immune. -Se répartissent en deux groupes : -Le compartiment systémique : rate, ganglions lymphatiques. -Le compartiment muqueux : le tissu lymphoïde associé aux muqueuses, glandes mammaires. 1- Les ganglions lymphatiques : -La circulation lymphatique s’effectue dans un seul sens : tissus➔ ganglions ➔ sang. Fonctions : – Filtration non spécifique de substances particulaires et de micro-organismes, à partir de la lymphe, par activité phagocytaire des macrophages – Agrégation, activation et prolifération des LB et des LT

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Killer). NB : ➔B pour maturation dans la moelle osseuse (Bone marrow) NB : B identifié initialement dans la Bourse de Fabricius (petit organe présent chez les oiseaux - La moelle osseuse : se distingues-en : - la moelle rouge : à activité hématopoïétique -La moelle jaune : graisseuse, inactive.

Sites : 1- Vie foetale : a- Tissu conjonctif jusqu’au 2ème mois b- Foie foetal du 2ème au 6ème mois 2- Après la naissance : MO à partir du 4eme mois exclusivement. - Le thymus : -Situé dans le médiastin Antérosupérieur -Il est le site de maturation (processus de sélection) des lymphocytes T ➔Les précurseurs CD 34+ issus de la MO pénètrent dans le thymus ➔ Entament une différenciation-maturation du cortex vers la médullaire ➔ Acquièrent progressivement: le récepteurs de l’antigène TCR et les marqueurs de surface (CD2, CD3, CD4, CD8) -Au niveau cortical : La maturation des lymphocytes T est Généralités

NB : les lymphocytes possèdent une grande capacité de circulation - les lymphocytes qui ne reconnaissent pas d'antigène quittent le ganglion : en quelques heures par le compartiment lymphatique et la lymphe efférente pour rejoindre la circulation générale par le canal thoracique. -Répartition lymphocytaire ganglionnaire : Région Riche en Lym B périphérique organisé en sous corticale couronne =Follicule primaire Région Région mixte profonde comprend : proche du Lym B+ hile T+Plasmocyte + =Médullaire Macrophage Région -Entre les 2 paracorticale thymodépendante Riche en Lym T et CPA 3-Les systèmes lymphoïdes cutanés et muqueux : Respectivement situés sous les épithéliums de la peau et des tractus gastro-intestinal et respiratoire. -Annexes de ces muqueuses : Les amygdales pharyngiennes et les plaques de Peyer de l’intestin.

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marquée par trois types d'événements : 1- Modification de marqueurs membranaires de différenciation (CD) - disparition du marqueur de cellule souche hématopoïétique CD34 ➔ apparition provisoire de CD1 (il va disparaitre ensuite) ➔apparition des marqueurs spécifiques des cellules T : TCR et CD3. 2- Réarrangement des gènes codant pour le TCR NB : le TCR est non traduit chez le progéniteur car l’ADN comprend aussi des introns 3- Sélections clonales : dans la jonction corticomédullaire : ○ Sélection positive -> seulement les lymphocytes T capables de reconnaître les molécules étrangères ○ Sélection négative -> élimination des lymphocytes T qui pourraient reconnaître les molécules du soi ➔ 2% des lymphocytes passent dans la médullaire et quittent le thymus vers la circulation générale ● Passage des thymocytes matures dans la protection muqueuse. -A la naissance : les cellules NK ont 50% d’activité fonctionnelle comparativement au jeune adulte. Ce déficit relatif se corrige Généralités

-Recirculation des lymphocytes et migration dans les tissus : Les lymphocytes sont les cellules qui circulent le plus. Ils circulent : NB : Les autres cellules sanguines circulent également : Les monocytes, qui se différencient en macrophages dans les tissus, et les cellules dendritiques « immatures ». Cellules Cellules dendritiques dendritiques immatures : matures : Captent -ne circulent pas l'antigène mais présentent puis l'antigène couplé circulent, au CMH). mais ne Par exp au cours présentent de pas l’inflammation++ l'antigène -Les LBs effecteurs : -restent dans les organes lymphoïdes -ils secrètent des anticorps qui pénètrent dans le sang pour qu’ils rejoignent les microbes et les toxines.

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rapidement dès la première année de vie. -Les lymphocytes T CD4 néonataux ont aussi un déficit intrinsèque de réponses cytokiniques. BONUS : • Les cellules impliquées dans la destruction des cellules tumorales : − LES NK (les plus importantes) − Macrophages activés / PNN • L’hyperpolynucléose neutrophile peut se voir dans : − Tabagisme − L’effort physique − Corticoïdes • les PNN peuvent secréter l’histamine L’opsonisation peut être : − Spécifique : via les R-FC des IgG − Aspécifique : via les récépteurs du complements − Augmente l’adhérence et l’ingestion surtout des bactéries encapsulées sans augmenter la vitesse de dégradation ‘’la cytocidie’’ Les cellules qui interviennent dans le phénomène de l’ADCC : − PNN, éosinophiles, macrophages, plaquettes, NK les effecteurs immunologiques qui éliminent le staph avec la plus grande spécificité : − AC et complément : par processus d’opsonisation les AC peuvent inhiber la pénétration du virus dans la cellule par interaction entre la cellule et l’AC • Les cellules hyperbasophiles de la MNI = Lymphocytes T activés

Bonus : − Maladie des chaines lourdes alphas : LYMPHOME MEDITERRANEEN ➔ maladie MONOCLONALE. − Géographie : pourtour méditerranéen Terrain : Adulte jeune 2030ans − Clinique : diarrhée + malabsorption

Généralités

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− Diagnostic repose sur la mise en évidence de la chaine lourde alpha dans le sérum sans la chaine légère − Traitement : Antibiothérapie dirigée contre les infections intercurrentes (parasite, virus, helicobacter pylori, campylobacter jejuni) en cas d’échec ➔ chimiothérapie

➔Auto anticorps rencontré dans le syndrome de SHARP : • AC anti RNP

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Généralités

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Les Antigènes I-Définition et propriétés : − Substance capable d’induire une réponse immunitaire spécifique, principalement d’origine exogène. -2 propriétés essentielles distinctes : L’immunogénicité -capacité d’un antigène à stimuler le système immunitaire pour le développement d’une réponse immune efficace.

L’antigénicité -capacité d’un antigène à se combiner spécifiquement avec les effecteurs humoraux et/ou cellulaires (anticorps/ TCR) par complémentarité de structure. -Toute molécule immunogène est antigénique -Toute molécule antigénique n’est pas forcement immunogène ➔Cas des Haptènes : • Molécules antigénique non immunogénique de faible PM avec une Structure très simple (comme les médicaments) • petites molécules qui ne peuvent pas induire de réponses immunitaires seules et doivent être combinées à des protéines « appelées porteuses ou «carriers». • L’haptène ne se fixe pas aux LT mais peut se fixer aux LB spécifiques et aux macrophages spécifiques. II-Différents types d’antigènes : 1-Selon l’immunogénicité Un antigène peut être 1-Immunogène :

Les Antigènes

Réponse Protectrice Ag immunogène ➢ Protéine hétérologue : exp : d’o infectieuse ➢ Protéines allogéniques : -protéines d’histocompatibilité (leucocytes, tissus)

Ag non immunogène -Substances du soi -Substances syngéniques (jumeaux homozygotes): par identité structurale. -Haptènes : substances de très faible PM, de structure chimique très simple. 8

2-Allergène 3-Tolérogène

-molécules des groupes sanguins (GR Réponse néfaste de type allergique Réponse négative avec absence de réactivité : Exp : Ag soluble désagrégée (non agrégé) R ! la tolérance n’est pas définitive En théorie : s’observe mieux chez le jeune animal, par l’administration préalable de substance immunosuppressive, transmis à un autre animal par lym T

-Un haptène fixé spontanément ou artificiellement sur une protéine libre ou cellulaire agit comme un nouvel épitope et induit une réponse immune en anticorps. ➔ La forme conjuguée : (couplage hapten-carrier (ova-albumine)) est immunogenique et provoque la production : • d’anticorps anti-haptènes • anticorps anti carrier • anticorps anti « hapten-carrier » − Il existe des relations très étroites entre la structure des Ag et la nature des réponses qu’elles induisent : Réponse T dépendante: -résulte d’une reconnaissance à la fois par les LT et les LB: on parle d’Ag Thymo-dépendants ou T dépendants. -Les Ag T dépendants représentent la majorité des Ag auxquels peut se trouver confronté le système immunitaire : -protéines hétérologues -allo-antigènes de transplantation. -Absence d’activation polyclonale -Mémoire (+) -Maturation d’affinité/commutation isotypique : (+) -Les centres germinatifs ne sont formés que dans ce type de réponses Les Antigènes

Réponse T indépendante -Due à des Ag dits Ag thymoindépendants -capables d’induire une réponse indépendante des lymphocytes T. -Mécanisme : LB s’n passe des 2 signaux nécessaire a l’activation car l’ag contient des epitopes répétitifs suffisant à activer les LB. On distingue :

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NB : necessite la présence d’une CPA ‘’exp : macrophage ‘’ + LT + LB

Les Antigènes

-Ag T -Ag T indépendants de indépendants de type I type II -puissants -déterminants activateurs de LB antigéniques -mitogènes= répétitifs capables d'induire -dépourvus les divisions d’activité cellulaires. mitogène. entrainant Ex: l’activation polysaccharides polyclonale de solubles (PSS III du ceux-ci à forte pneumocoque). dose. Ex: LPS bactériens -Mémoire : (-) -Commutation isotypique (-) -Maturation d’affinité (-) -Expansion Poly clonale (Seulement type 1 ➔Mitogéne )

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Epitope = DETERMINANT ANTIGENIQUE : -les cellules immunitaires ne reconnaissent et n’interagissent pas avec toute la molécule antigénique -elles reconnaissent des epitopes ou déterminants antigéniques -c’est la région active immunologiquement qui se lie spécifiquement aux récepteurs membranaires des lymphocytes ou aux anticorps. -Les lymphocytes T et B reconnaissent des epitopes différents dans un même antigène. ➔2 Types d’épitopes : a- Séquentiel: structure primaire b- Conformationnel : tridimensionnel ➔ exp : myoglobine. 2-Selon l’origine : On distingue 4 types d’Ag : -Les antigènes hétérologues (xéno-antigènes) : provenant d’espèces différentes. -Les antigènes syngéniques (iso-antigènes) : portés par tous les individus d’une même espèce. -Les allo-Ag : portés par un groupe d’individus au sein d’une même espèce. -Les auto-Ag : qui sont des constituants du soi. III-Facteurs influençant l’immunogénicité : 1- Caractère étranger à l’organisme : pour être immunogènes, l’antigène doit être reconnu par le système immunitaire comme étranger, donc dit « non soi». 2- Taille moléculaire : Le pouvoir immunogénique est, en général, d’autant plus fort que la masse moléculaire est plus élevée. 3- Composition et hétérogénéité chimique : Les protéines sont les meilleurs immunogènes, certains polysaccharides sont également immunogéniques. ➔Les lipides et beaucoup de molécules de nature diverse peuvent se comporter comme des haptènes. 4- Taux d’antigène administré : -Une dose insuffisante d’antigène tout comme une dose exagérée !! n’entraînera pas de réponse immunitaire et peut même induire un état de tolérance. NB : Une dose excessive peut induire une tolérance. Les Antigènes

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5- L’utilisation d’adjuvants : -Les adjuvants sont des substances non spécifiques capables d’augmenter l’immunogénicité d’un antigène sans intervenir sur sa spécificité. Ils agissent en : a- Prolongeant la présence de l’antigène. b- Augmentant les signaux de co-stimulation c- Induisant la formation de granulomes. Trois catégories d’adjuvants : Minéraux+++, huileux, bactérien 6- Génotype de l’individu : 7- La complexité de l’antigène : les molécules larges insolubles sont généralement plus immunogeniques que celles petites et solubles, puisqu’elles tendront plus à être phagocytées et présentées. • Reconnaissance de l’antigène par les lymphocytes T et B :

Reconnaissance de l’Ag par les lymphocytes B: - Reconnaissent l’Ag sous sa forme native -ses épitopes sont le plus souvent des sites très accessibles à sa surface. -Ces épitopes peuvent avoir une séquence d’acides aminés séquentiels ou alors non séquentiels (imposés par la conformation secondaire ou tertiaire, dans ce cas les anticorps dirigés contre la forme native de la protéine ne se lient pas à la protéine dénaturée, puisque la complémentarité sera perdue par perte de la conformation « epitope conformationnel »)

Les Antigènes

Reconnaissance de l’Ag par les lymphocytes T: -Les déterminants reconnus par les lymphocytes T sont généralement constitués de séquences d’acides aminés internes (enfouis à l’intérieur de la molécule protéique) -ils deviennent accessibles au système immunitaire par apprêtement de l’Ag : processus qui fragmente une protéine en petits peptides qui se combinent aux molécules du CMH de classe I et II. -Les complexes résultants: peptideCMH sont ensuite présentés à la surface des cellules du soi altérées ou des cellules présentatrices d’Ag.

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L’Ag et les différentes voies de pénétration : − Antigènes éliminés d’autant plus vite du sang que leur taille est grande, et leur pouvoir immunogénique élevé. − ntigènes particulaires : éliminés par phagocytose en quelques heures. − Antigènes solubles : persistent pendant plusieurs heures dans le sang. Administration sous L’antigène reste localisé dans un premier cutanée+++++ temps près du site de l’injection, notamment dans les ganglions régionaux où il apparaît en quelques minutes. Ces ganglions sont le siège d’importantes modifications morphologiques. Administration par voie L’antigène, en grande partie est dégradé ou Orale éliminé par le tube digestif. Une petite partie de la dose ingérée atteint les plaques de payer puis les ganglions lymphatiques mésentériques. Injection intraveineuse

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Les Antigènes

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Les composants de l’immunité innée Les cellules médiatrices de l’immunité innée sont : A- Les phagocytes : Ce sont les éboueurs de l’organisme = Scavenger, parmi ces cellules, on compte : les macrophages, les cellules dendritiques et les polynucléaires. 1-Les macrophages : -Représente 8% des leucocytes sanguins / 1/2 vie : 12- 100H - font partie de l’immunité naturelle non spécifique. -Ces cellules envahissent le foyer inflammatoire En deuxième position après les polynucléaires neutrophiles. -Leur fonction est la phagocytose d’agents infectieux et les déchets autologues. -Comme les autres cellules de l’immunité innée, certains de ses fonctions établissent un pont avec l’immunité adaptative. Origine : monocytes sanguins (la forme tissulaire des monocytes) : acquièrent une forte capacité de phagocytose et survivent dans ces sites pendant des périodes prolongées (jusqu'à des années)

Morphologie : Un noyau caractéristique en forme de haricot. Ne possèdent pas de granules Disposent de nombreux lysosomes (contenus similaires à ceux des granules des neutrophiles) Localisation : Les macrophages sont diffus dans l’organisme : • Les histiocytes (cellules fixes) et les macrophages (cellules libres) dans le tissu conjonctif. • Les cellules de Kupffer du foie • Les cellules synoviales dans la capsule synoviale. • Les cellules micro gliales dans les tissus nerveux Les composants de l’immunité innée

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• Les cellules alvéolaires ou septales dans les poumons… • Les ostéoclastes dans les os • Dans le sang, les polynucléaires neutrophiles (ou granulocytes neutrophiles) et les monocytes. 2-Marqueurs de surface : -TLR (fait partie des PRR) -CD 14 ➔ Récepteur de LPS -Récepteurs pour les cytokines -Récepteurs pour les fractions du complément : CR3 et CR4 (opsonisation) - Récepteurs pour les fragments Fc des IgG (opsonisation) : On distingue trois récepteurs différents, possédant : -Une affinité élevée (CD64) : dominant sur monocytes/ intermédiaire (CD32) : dominant sur granulocytes / faible (CD16) dominant sur NK -Ces trois types de récepteur sont exprimés sur les monocytes et les macrophages - Molécules d’adhésion : LFA-1, ICAM-1 -Molécules de CMH I et CMH II RQ : les CR3, CR4 et LFA-I ➔ appartiennent à la famille des intégrines. DONC en tout : MACROPHAGE TLR CD14 CD16, CD32, CD64 LFA1, ICAM1 CR3, CR4 CMH1, CMH2 3-Molécules produites : − Enzymes protéolytiques (protéase) − Facteurs chimiotactiques (Chimiokines) − Métabolites de l’acide arachidonique (leucotriène, PGE…) − Radicaux libres − Composants du complément − Facteurs de croissance, qui servent à réparer le tissu lésé et à le remplacer par du tissu conjonctif. − Facteurs de coagulation − Les prostaglandines et Cytokines pro inflammatoires : IL-1, IL-6, TNF α Les composants de l’immunité innée

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II-Fonctions : 1-Phagocytose : • Phénomène actif et consommateur d’énergie : efficacité accrue par l’opsonisation. Les étapes : 1 – Chimiotactisme 2 – Capture : A- interaction moléculaire membrane - paroi : Rôle d’un ensemble de lectines B- Interaction par l’intermédiaire d’opsonines : C3bi, CR3 (CD11b/CD18) +++

➔Opsonisation : FACILITATION DE LA PHAGOCYTOSE VIA : - Récepteur Fc des Ig - Récepteur pour la C3b et C4b du complément 3 - Endocytose : -L’internalisation ➔ formation d’un phagosome ➔ fusionne avec un lysosome➔ formation d’un phagolysosome ➔ où le micro-organisme est détruit.

➔La Formation de phagosome : − Augmentation de consommation d’O2 − Augmentation de production de lactate. − Stimulation du cycle des hexoses mono-phosphates 2--Formation de phagolysosome ➔Présentation de l’antigène : − Le macrophage fonctionne comme une CPA efficace uniquement dans un contexte infectieux − L’INFgamma active les macrophages : − Augmente l’expression des HLA 1 et 2 − Augmente le métabolisme oxydatif et la production des cytokines par les macrophages.

Les composants de l’immunité innée

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➔ Les anticorps produits facilitent la phagocytose par opsonisation. ✓ Cytotoxicité Cellulaire Anticorps Dépendante (ADCC) III-Cellules dendritiques myéloïdes (conventionnelles) : ➢ Distribution : a- Cellules dendritiques du sang périphérique : - Un très faible nombre isolé à partir du sang (2% des cellules mononuclées du sang), il s'agit probablement de : - Précurseurs des cellules dendritiques (en route de la moelle osseuse vers les tissus). - Ou de cellules différenciées, matures (en route du tissu vers les OLsecondaires) CD de la peau CD des Tissus non lymphoïdes CD dans les canaux lymphatiques afférents CD des organes lymphoïdes

Cellules de langerhans (granules de BIRBECK) CD interstitielles ➔ présente dans tt les tissus a l’exception de : cornée et parenchyme cérébral Cellules voilées ➔ Se localise dans la ZONE T

CELLULES INTERDIGITEES : • Thymus : zone médullaire ➔ jonction corticomédullaire • RATE : manchon péri artériolaire ➔ Pulpe blanche • GG lymphatique : PARA CORTEX • Tissu lymphoïdes associé aux muqueuses MALT CD folliculaires : Dans les follicules lymphoïdes Présentent aux LB de façon prolongée ➔réponse T dépendante 1-Molécules de surface : ➢ CMH 1 et 2 ➢ Molécules de costimulation : CD80, CD86, LFA… ➢ TLR ➢ R- cytokines

Les composants de l’immunité innée

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2-Fonctions : A-Rôle dans l’activation des LT :

CD présente capte l’Ag et le présente au niveau des OLII sous forme de peptide apprêté associé au CMH ➔ interaction avec LT naïf ➔ réponse immunitaire T spécifique. -Les CD existent sous 2 états différents : - CD immatures dans les tissus :

CD matures : dans les zones T des OL II -Captent l’Ag et circulent mais ne -sont spécialisées dans la présente pas présentation des complexes CMH-spécialisées dans la capture et Peptide aux LT l'apprêtement de l'antigène -Ne circule pas - elles sont incapable de stimuler -stimule les LT de façon efficace les lymphocytes T de façon efficace - (exp : les cellules dendritiques épithéliales) NB : Au cours du processus de migration, les cellules dendritiques deviennent matures : c’est-àdire qu’elles se transforment en CPA capables de stimuler les lymphocytes T. ➔Cette maturation se traduit par : − Une diminution du mécanisme de captation des antigènes. − Diminution de l'expression de CD1 et les récepteurs Fc. − Augmentation de l'expression membranaire des molécules de costimulation et des molécules du CMH de classes 1 et II. Tableau : Maturation des CD Progéniteur : MO

Sang : immature :

Au niveau lym : Maturation au contact de l’Ag CD34+ CCR6+ / CCR7CCR6-/CCR7+ Reconnaissance de l’antigène : Les CD immature reconnaissent l’antigène par des récepteurs non spécifiques appelés «Pattern Recognition Receptors » ou PRRs. - Les antigènes solubles présents dans la lymphe : sont captés par les cellules dendritiques qui résident dans les ganglions lymphatiques.

Les composants de l’immunité innée

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- Les antigènes présents dans le sang sont captés par des cellules dendritiques de la rate. IV-Présentation de I' Ag aux LT Il existe deux voies : Voie des Ag endogènes Voie des Ag exogènes Faisant intervenir les molécules Faisant intervenir les molécules HLA de classe I et les LTCD8+ HLA de classe Il et les LTCD4+ ➢ Interaction CPA-LT et Activation des LT : − Lieu : GG lymphatique L’interaction T-CPA implique : Une liaison entre le TCR / CD3 avec le CMH-PP et entre le CD4 / CD8 et le CMH II / CMH I ➢ 1er signal d’activation : Intervention des molécules de coactivation (co-stimulation) : • CD28 – CD80 • CD28 – CD86 ➢ 2ième signal d’activation : Intervention des molécules d’adhésion : • CD2 – CD58 • LFA1 –ICAM1 CMH1/2 intracellulaire CMH1/2 extracellulaire CD1a Capture Ag et phagocytose Présentation Antigénique Stimulation des LT Co molécules de stimulation (CD40 ; CD80…) Récepteurs des chimioKine Sécrétion de Il 12

Les composants de l’immunité innée

CD immature +++++ --++++ ++++ + + +

CD mature --+++++ + + +++++ +++++ ++++

CCR6++++ CCR7+ +

CCR6+ CCR7+++++ ++++

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NB : Les cellules dendritiques et les macrophages produisent l’IL-12 en réponse au LPS et à d’autres molécules microbiennes. • Le rôle de l’IL-12 est l’activation des cellules NK !! ➔ Rôle dans la tolérance centrale et périphérique des LT : ➔ Tolérance central : intervient dans la sélection négative ➔Tolérance périphérique : en présence d’IL10 et TGF➔ diminution de l’expression de HLA par les CD avec une diminution de la production d’IL12 II - Cellules dendritiques plasmacytoïdes : Les CDp ont une morphologie qui ressemble aux plasmocytes. - Fonctions : En plus de la présentation antigénique les CDp jouent un rôle très important dans l’immunité antivirale➔produisent de grandes quantités d’IFN α, plus que ce que produit n’importe quelle autre cellule immunitaire. -L’IFN α confère aux cellules non infectées par le virus un état antiviral. V-Extravasation des leucocytes ou la diapédèse : − La diapédèse correspond au passage des cellules immunitaires sanguines vers différents tissus cibles : − Polynucléaires et monocytes ➔ tissus conjonctifs. − Lymphocytes ➔organes lymphoïdes. La diapédèse se fait en plusieurs étapes : 1 –Pénétration d’un germe 2- contact avec les macrophages tissulaires 3-Libération de TNF et d’IL1 4-Activation de l’endothélium et expression des molécules d’adhérence ‘’Selectines E et P qui établissent une faible liaison avec les glucides présent a la surface des leucocytes ➔ rompu qui se reforme d’où le roulement 5-Activation par les TNF et Les IL1 des intégrines présents a la surface des leucocytes ➔ établissement d’une forte liaison avec l’endothélium ➔ aplatissement 6-Relâchement local ➔ passage trans endothélial du leucocyte (DIAPEDESE) ➔ extravasation le long du gradient de concentration des chimiokines jusqu’au site de l’infection.

Les composants de l’immunité innée

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NB : L’accumulation des leucocytes au niveau des sites d’infection, accompagnée d’une vasodilatation et de l’augmentation de la perméabilité vasculaire, est appelée inflammation. VI-Les Lymphocytes Natural Killers (NK) - Les cellules NK constituent le troisième type de lymphocytes. - douées de propriétés cytotoxiques et sécrétoires - Elles sont capables de tuer des cellules étrangères, cancéreuses ou infectées par un virus, directement, sans spécificité, ni activation et ni immunisation préalable. - Représente 5 -15 % des lymphocytes sanguins. 2-Différentiation et maturation : • Précurseur médullaire commun aux lymphocytes T et lymphocytes B : CD34+ • Différentiation dans la moelle osseuse. • N'expriment pas le récepteur spécifique de l'antigène des lymphocytes T (TCR/CD3), ni l'immunoglobuline membranaire des lymphocytes B (BCR). -Phénotype : Deux Marqueurs caractéristiques, mais non spécifiques, sont : le récepteur de faible affinité de l'IgG (CD 16) ainsi que la molécule d'adhésion CD56 (NCAM). 5-Fonction : 1 – Cytotoxicité : les cellules NK sont capables de tuer des cellules tumorales ou infectées par un virus en l'absence de stimulation préalable. - Cette activité cytotoxique n'est pas restreinte par le CMH ➔ à la différence de LT cytotoxique Les composants de l’immunité innée

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2 - Sécrétion de cytokines : particulièrement l'IFN γ et le TNF α Remarque : Toutes les cellules portant un récepteur pour le Fc des Ig peuvent intervenir au cours de la réponse immunitaire spécifique grâce au phénomène d’ADCC. (Ex : les monocytes/macrophage, les PNN, les PNO …) NB : Nos propres NK ne nous tue pas ➔ par l’expression de nos cellules des molécules de CMH1 ➔ express yourself or die ! N.B. Ce n’est pas l’absence de molécules de CMH –I qui déclenche l’activation des lymphocytes NK, mais c’est plutôt la présence de ligands activateurs non compensés par des signaux inhibiteurs suffisants C’est la notion de « balance ou d’équilibre » entre les signaux activateurs et inhibiteurs. Ce qui explique que certaines cellules sont protégées des NKs malgré l’absence du CMH1 comme les neurones, les GR, et les hépatocytes (dans certaines pathologies). Les différentes voies de cytotoxicité : La cytotoxicité La cytotoxicité La cytotoxicité via la cellulaire naturelle voie Fas dépendante de la /Fas-ligand présence d'anticorps : ADCC -1er étape : contact - s'exerce en absence -Faisant intervenir le entre les cellules NK d'anticorps. couple : et leurs cibles. -grâce à des -Fas ligand (détecté -2eme étape : La récepteurs sur les cellules NK) et fixation de activateurs de la le CD95 exprimé à la l’immunoglobuline cytotoxicité naturelle. surface de la cible. (lgGl ou lgG3) par le -Cette voie conduit à récepteur de I' l'apoptose sans ADCC exocytose des -le CD16 permet la granules intra lyse des cellules cytoplasmiques. résistantes à la cytotoxicité naturelle. NB : 3 types de cytokines activatrices des NK :

• IFNα, IFN β ➔

Activation des NK

Les composants de l’immunité innée

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• IL-12 ➔ synthèse d’IFNγ + augmentent l’activité cytotoxique des NK • IL-15 ➔ Prolifération des NK NB : La cellule NK n'est donc pas seulement un " tueur" du système immunitaire, mais une cellule potentiellement capable d'orienter la réponse immunitaire adaptative par sa production de cytokines. NB : La Cellules NK est utilisée dans la thérapie : anticancéreuse III - Reconnaissance des antigènes microbiens dans l’immunité innée : par interaction entre : • Récepteurs présents à la surface des cellules de l’immunité innée : PRR • Récepteurs présents à la surface des especes microbiennes : PAMP (pathogène associeted molecular partteners) 1. PAMP (Pathogen Associated Molecular Pattern) : Motifs Moléculaires Associés aux Pathogènes : Principales caractéristiques : 1. Produite uniquement par les microbes ➔absents chez l’hôte 2. Non spécifiques ➔ PAMP sont invarients pour une classe de microorganisme ➔ PRR limité 3. Ce sont des molécules necessaire a la survie des microbes ➔ si absente ➔ létal pour le microbe (par opposition aux épitopes de l’immunité specifique ou elles ne sont pas necessaire a la survie du microbe ou leurs mutations peut s’observer) • Exp de PAMPs : − LPS ou endotoxine des BGN − Peptidoglycane sur la paroi des BG positives − Acide lipotéichoique − ARN double brins chez les virus 2- PRR : • Permettent la discrimination de classe de pathogène • Ne sont pas distribué de façon clonale • Réarrangement qui n’est pas necessaire par opposition au Rspecifique (TCR et Ig) • Famille de PRR : TLR, NLR, CLR… • Localisation : Cellules phagocytaires, dendritiques, lymphocytes, épithéliales… Les composants de l’immunité innée

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NB : Ces récepteurs sont aussi impliqués dans la reconnaissance de signaux de danger non microbiens appelés DAMP (Damage associated Molecular Patterns) telles que les protéines de choc thermique !! (HSP ou Heat Shock Proteins) et I' ATP (Adenosine Tri Phosphate). BONUS : • La phagocytose des bactéries nécessite l’adhésion a la surface des cellules phagocytaires, concerne essentiellement les germes extra cellulaires, augmenté par l’opsonisation et la réponse immunitaire, effectué par les PNN et les macrophages. • Les perforines et les granzymes font partis de l’immunité spécifiques et non innée car ils font partie des LT cytotoxique (#défensine et lyzozome qui font partie de l’immunité innée).

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Les composants de l’immunité innée

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Déroulement de la réponse immunitaire innée Les cytokines pro-inflammatoires Les substances vasodilatatrices

TNF-α, IL-1, IL-6, IL-12 et IL18. • Histamine • Le NO • Les EICOSANOIDES : leucotriènes • LES PROSTANOIDES : prostaglandines, thromboxane, prostacycline Les cytokines anti-inflammatoires • TNF-β • IL10 Régulent la réaction inflammatoire, permettant ainsi qu’elle ne devienne pas exagérée et donc pathologique. ➢ Action des protéines de l’inflammation sur les différents organes : IL-1 : ➔sur l’hypothalamus : induisant la synthèse de prostaglandine à l’origine de la fièvre. ➔Sur moelle osseuse : induisant la synthèse de facteurs de croissance. ➔Synthèse de fibrinogène et des facteurs du complément (induite par les IL-12 et IL-18) et qui permet la modulation de l’activation des lymphocytes T. − PNN : C’est le type de polynucléaires le plus important en nombre et en fonction − Le premier qui entre en contact avec le germe. − Tuent les microbes intracellulaires de façon non spécifique. NB : LTH1 LTCD8+ -Reconnaissent les antigènes -Reconnaissent les antigènes intra-vacuolaires des phagocytes cytoplasmiques des cellules infectées Déroulement de la réponse immunitaire innée

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➢ Réponse immunitaire antivirale : Rôle de l’immunité innée Role de l’immunité adaptative 1- Rôle des LTc : • Rôle des NK • Par contact membranaire en • Rôle des interférons : utilisant les récepteurs de ✓ Les IFN- α/β sont produits mort cellulaire : Fas et TNFRpar toute la cellule I (ces derniers sont présents infectée par un virus >> sur la cellule cible) induisent une "résistance” des cellules • Par libération des granules aux infections virales. cytotoxiques contenant la ✓ Les interférons de type 1 Perforine et les Granzymes. (IFN-α/β) sont les éléments « clefs » d’une 2-Rôle des LBs et des anticorps : réponse antivirale. − Neutralisation virale : • Rôle des macrophages : Empêche la dissémination -Phagocytose des virus et des virale (IgA dans les cellules infectées secrétions, IgG dans la NB : NO inhibe les infections à HSV circulation) et Poxvirus − Virolyse : lyse du virus (doit être enveloppé) − Activation de la voie classique du complément (Bcp de molécules virales nécessaire à la surface cellulaire) − ADCC : Moins de molécules virales nécessaire à la surface Echappement des microbes a l’immunité : Exp : Mycobacteries, Toxoplasma, Inhibe la fusion des leishmania phagolysosome HSV, CMV, EBV : Inhibe la présentation de l’Ag EBV : Production par les cellules infectées d’IL10 ➔inhibition de l’activation des macrophages et des cellules dendritiques

Déroulement de la réponse immunitaire innée

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Immunité Antiparasitaire /Antimycosique : Immunité antiparasitaire : Immunité antimycosique : -Associée surtout à une réponse ✓ L’immunité innée contrôle la Th2 +++++ : plupart des infections fongiques: ➔A MEDIATION HUMORALE PNN, Phagocytose, Voie alterne et - production d’IgE et d’activation des lectines de Mastocytes, éosinophiles et de ✓ L’équilibre de la flore commensale joue un rôle lymphocytes. important pour limiter la croissance de champignons opportunistes comme Candida albicans. ✓ Implication de l’immunité adaptative (certaines infections fongiques retrouvées chez les iD)

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Déroulement de la réponse immunitaire innée

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Le système du complément I-Définition : Plus d’une quarantaine protéines qui circulent à l’état inactif (il faut un activateur) a l’exception du facteur D qui est une sérine protéase circulant à l’état activé. − Intervient Dans la défense innée contre les agents infectieux. − L’activation en cascade d’une partie de ses composants a un triple résultat : 1- lésions irréversibles des membranes cellulaires 2- apparition de produits biologiquement actifs dans l’inflammation 3- stimulation du processus de coagulation. -Cette activation se fait selon trois voies : - Classique : C4bC2a ➔ C3convertase - Alterne : iC3Bb ➔ C3convertase - Voie des lectines ➔ C4bC2a ➔ C3 convertase Qui convergent, toutes vers un point commun : le C3 pour aboutir à un tronc commun terminal (C5- C9) appelé complexe d’attaque membranaire (MAC) ou complexe lytique. II-Nomenclature : - Composants de la voie classique et de la voie effectrice commune est noté par la lettre C suivie d'un chiffre (ex. C1, C2 ...C9). - Les composants de la voie alterne : sont appelés facteurs et désignés par une lettre majuscule (ex. facteur B, facteur D, properdine « P »). - Les protéines de régulation sont appelées par leur nom exp : inhibiteur de la Cl-estérase (Cl-inh), C4-binding-protein (C4-bp)… - Les fragments de clivage enzymatique sont représentés par des lettres minuscules (ex.). La lettre i désigne une molécule inactive, ex. C3bi. II-Les différents composants du complément : -Protéines ou glycoprotéines de PM variant entre 70 KD à 600 KD : Soit : ➔Retrouvée dans le plasma ➔ la majorité : représente 10% des globulines sériques ➔Soit localisée à la surface cellulaire -Sur le plan fonctionnel il s’agit soit de protéines d’activation soit de protéines de régulation : Voies Le système du complément

Activation

Régulation 28

Classique Alterne Voie des Lectines Complexes lytiques (Complexe d’attaque membranaire =MAC)

C1, C4, C2, C3 C3, B, D, P MBL, MASP1, MASP2 C5 ; C6, C7, C8 ; C9

C1inh, C4Bp H, I C1 inh, C4Bp • Vitronectine (prévient la formation du complexe d’attaque) • Clusterine • HRF (CD59) - Le chauffage à 56°c pendant 30 min détruit le C1, C2 et B. - Le Taux de renouvellement de ces composants est élevé : demi-vie = 24 à 48 heures. Leur synthèse est assurée par 4 types cellulaires :

III-Mécanismes d’activation du complément : L’activation des protéines du complément se fait par clivage.

Le système du complément

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NB : c’est le C3 et le C4 qui baisse précocement en cas d’activation du complément par voie classique. A-Voie classique :

1- Initiateur : ➢ Dans 80% des cas : Complexe immun (Ag-AC) ➔ nécessité de l’immunité adaptative • Seulement les IgM et IgG (1, 2, 3) sont capables de stimuler le complément par voie classique • Il faut 2IgG au lieu de 1 IgM ➢ Autres activateurs : BGN, CRP, protéine amyloïde B, corps apopototique… 2- Mécanisme d’activation de la voie classique : • C1 circule S/F pentamérique (C1r –C1s)*2 + C1q • Le C1q est reconnu par tous les activateurs de la voie classique. • C1s activé vient cliver le C4 en 2 fragments : a- C4a ➔ anaphylatoxine b- C4b ➔ se lie a C2 ➔ C4b-C2 ➔C1s clive C2 ➔ C2b +C2a ➔ complexe C4bC2a • Le complexe C4bC2a constitue la C3 convertase de la voie classique (activité enzymatique portée par le C2a) qui va cliver le C3 en C3a (anaphylatoxine) + C3b • C4bC2aC3b ➔ constitue la C5 convertase donne C5a (anaphylatoxine) + C5b • C4bC2aC3bC5bC6C7 ➔ Constitution d’un état lipophile ➔ fixation sur les lipides membranaires • En étant fixé sur les lipides membranaires captent C8 et C9 Qui forme le complexe d’attaque membranaire ➔ qui se fixe dans la bicouche lipidique ➔ forme un canal trans membranaire ➔ responsable de la lyse cellulaire par OSMOSE • Déficit en C1 : observé dans le LUPUS ➔ c’est le lupus qui induit le déficit et non l’inverse. B-Voie alterne :

1- Initiateurs : particules pathogènes d’origine microbienne : • Lipopolysaccharides des BGN Le système du complément

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• Acide téchoique, champignon, parasite, virus, certaines cellules tumorales, GR hétérogènes … • EN CAS DE DEFICIT : épisode infectieux récurrent 2- Elle est moins efficace que la voie classique 3- Ne requiert pas la présence d’AC ➔ par opposition à la voie classique. 4- Mécanisme d’activation : • La voie alterne commence par La C3 ➔ hydrolysé lentement dans la circulation pour donner iC3 ou C3(H2O) • iC3 se lie au facteur B ➔ iC3-B (dans la circulation ➔ substrat pour le facteur D (sérine protéase ➔protéolyse du B ➔ iC3Bb ➔ C3 CONVERTASE D’initiation de la voie alterne • Pour la suite ➔ la même chose C-La voie des Lectines :

1- Initiation : par liaison du MBL aux sucres terminaux à la surface des micro-organismes • MBL : protéine qui circule a l’état libre, apparenté au C1q • Après sa liaison, MBL change de conformation ➔ activation de MAPS2 ➔ qui clive C4 et C2 ➔ formation de C4bC2a ➔ ensuite suit le même cheminement IV-Contrôle de l’activation de la voie du complément :

V-Rôles du complément : Quatre rôles majeurs :

Le système du complément

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1-Défense contre l’infection :

2-Elimination des 3-Rôle dans la réaction complexes immuns et inflammatoire : des corps apoptotiques :

Le système du complément

4-Rôle d’interface entre immunité innée et adaptative :

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par deux mécanismes : 1- Elimination des complexes immuns : a- la formation du Fixation du complexe d’attaque complément sur les membranaire complexes entraîne la solubilisation des b- Opsonisation : le dépôt des fractions complexes immuns en C3b, C4b, iC3b, et empêchant les C3dg (appelées interactions entre les opsonines) à la fragments Fc, les fragments Fc ne se surface des microorganismes, fixeront pas les uns sur les autres et il n y aura entraîne l’intensification de pas de formation gros complexes insolubles leur phagocytose par les cellules qui peuvent phagocytaires (PN, se déposer dans les Mo et tissus. Macrophages) Les complexes immuns exprimant les deviennent alors récepteurs du circulants (CIC) et sont complément CR1, captés par les CR3 et CR4. érythrocytes ➔ils sont acheminés vers le système réticuloendothélial pour y être éliminés.

-La fonction proinflammatoire du complément, est essentiellement due aux anaphylatoxines C5a, C3a et C4a libérées lors de l’activation du complément. - Effets : -chimiotactisme -La contraction des muscles lisses et l’augmentation de la perméabilité vasculaire. -La dégranulation des mastocytes et des basophiles entraînant la libération de l’histamine et d’autres médiateurs -Le C5a est l’anaphylatoxine la plus puissante. !!! -L’activité des anaphylatoxines est régulée par une protéase sérique 2- Elimination des corps appelée apoptotiques : carboxypeptidase N. Activation de la voie classique

-Le complément contribue dans le développement d’anticorps spécifiques à divers antigènes Tdépendants et T indépendants.

VI-Les déficits en complément : - Ils peuvent être quantitatifs, qualitatifs ou fonctionnels : A-Déficits héréditaires : - Rares (la plupart selon le mode autosomique récessif)

Le système du complément

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- Ils sont souvent associés à des infections ou à des maladies autoimmunes. - -Des déficits en chacun des composants de la cascade d’activation du complément ont été rapportés, à l’exception du facteur B de la voie alterne. Protéines déficitaires Protéines de la voie classique : C1 (C1q, C1s, C1r) C2, C4 Protéine de la voie alterne : Protéine D et properdine Complexe d’attaque membranaire : C5 ; C6, C7, C8, C9 MBL (déficit de la protéine de la voie des Lectines (déficit le + fréquent =5% de la population mondiale)

Conséquences : Associé au Lupus ➔c’est le lupus qui induit la diminution du Complément et non l’inverse Episodes infectieux récurrent a pyogènes Susceptibilité aux infections a Neisseria Susceptibilité aux infections du tractus respiratoire supérieure chez le NRS entre 6-18Mois

-Les déficits en protéines de régulation et récepteurs de fragments du complément sont également connus : Déficit en C1 l’angio-oedème héréditaire, associé à des épisodes inhibiteur (de récurrents d’oedèmes sous cutanés et sous-muqueux la voie (URTICAIRE PROFONDE), mortels dans le cas classique et d’oedème laryngé (asphyxie) sa transmission est des lectines) autosomique dominante. ✓ Ne donne pas d’urticaire superficielle ⓲ ✓ Donne des douleurs abdominales parfois pseudochirurgical • un taux bas de C2 et C4 / C3 normal - type 1 : quantitatif ➔ déficit quantitatif en C1inhibiteur - type 2 : qualitatif ➔ déficit qualitatif en C1inhibiteur - type 3 : il n’est pas lié a un déficit en C1inhibiteur mais a une hyper activité du kininogéne responsable d’une hyper libération de bradykinine

Le système du complément

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C4Pb (voie classique et de lectine) Fac H (voie alterne) CD59 (protectine) Properdine

Symptômes de la maladie de Behçet

Sd Hemolytique et urémique atypique, Glomérulonéphrite Hémoglobinurie paroxystique nocturne

Mode lié au sexe Porté par X (ne touche que les garçons) VII-Déficits acquis : • Plus fréquents que les déficits primitifs • Majoritairement associés à des pathologies caractérisées par une consommation exagérée des protéines du complément via son activation :

Production d’auto-AC ➔ forment des complexes immuns ➔ qui activent le complément d’une façon massive ! Par consommation Cirrhose du Foie Près de 90 % des composants du complément sont le fait d’une synthèse hépatique, Par déficit de synthèse Infections à BGN Forte activation du complément ! Cryo-globulinémie Hypo-complémentarité due à une activation de la voie classique ! NB : (Ac anti iC3Bb)=FACTEUR NEPHRETIQUE ➔ stabilise la convertase C3 ➔ consommation de C3 LED

VIII-Exploration du système de complément : Méthodes d’exploration des protéines du complément : PRELEVEMENT SE FAIT SUR SANG TOTAL + TUBE SEC ++++

Activité hémolytique 50% = CH50 : test hémolytique qui explore l’activité fonctionnelle des protéines de la voie classique et de la voie finale commune (de c1 jusqu’à c9). Dosage antigénique de C3 et C4 : par immunonéphlémétrie Le système du complément

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Dosage antigénique des différentes protéines du complément : ELISA ; immunodiffusion. 1-Démarche diagnostique : ➔ Première intention : on dose le CH50, C3 (commun aux trois voies), C4 (spécifique aux voies classique et lectine). Exemples : -CH50 normal, C3 CH50 élevé, C3 élevé et -CH50 baissé, C3 normal et C4 normal C4 Elevé baissé et C4 : baissé : Aucun résultat L’hypercomplémentémie Insuffisance objectif, mais il peut est observée au cours de hépatocellulaire ou ; quand même y avoir l’inflammation et des Deux déficits un déficit soit dans la infections héréditaires « trop voie alterne soit la rare, voie des lectines invraisemblable » (composants non Alors on dose C1q s’il dosés par la est bas CH50) ➔hyper-activation de la voie classique ou de la voie des lectines et déficit par hypercatabolisme de ces composants du complément. NB : Le CH50 : est augmenté dans les maladies infectieuses et inflammatoires, abaissé dans les maladies à complexes immuns.

Le système du complément

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Bonus : • Le déficit en complément favorise les infections, mais pas les infections opportunistes. • Le déficit en complément ne peut pas lier à un déficit en Haplotype du HLA ➔ prouvé. • Un prélèvement du sang pour étude du complément : − Se fait sur sang sur T° ambiante, ne doit pas être fait sur un anticoagulant et il peut se faire sur un sang qui dépasse les 24H.

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Le système du complément

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Les Lymphocytes T I-ONTOGENESE DES LYMPHOCYTES T Les LT se développent au niveau du Thymus RAPPEL HISTOLOGIQUE du thymus : Le lobule thymique est constitué : D’une région corticale - cellules nourricières (cellules nurses) + cellules épithéliales thymiques du cortex

D'une région médullaire Cellules épithéliales thymiques de la médullaire + cellules présentatrices d'Ag + macrophages (surtout au niveau de la jonction cortico-médullaire.)

II-ETAPES DE MATURATION DIEFERENCIATION DES LT MO : Le progéniteur lymphoïde (CD34 ; CD117 ; tdt+) ➔Pénètre dans le thymus par les capillaires de la jonction corticomédullaire ➔Puis migre jusqu'à la région sous-capsulaire et commence ses étapes de différenciation maturation dans le sens cortex-médullaire - Pour quitter définitivement le thymus étant devenu un LT mature. - Les étapes de cette différenciation : - Le marqueur le plus important qui est le récepteur spécifique de l'Ag (TCR). i. Stade I : Le progéniteur T qui pénètre dans le thymus, exprime encore les marqueurs de la MSC (CD34, Tdt) ii. Stade 2 : stade Double Négatif : Le pro-thymocyte perd le CD34 et continue a exprimer le Tdt et CD117 (signe de prolifération}. - Les premières molécules de surface des LT : CD2+, CD5+, CD7+ et le CD1 - A ce stade : thymocytes Double négatif : CD4 - CD8 - Les gènes du TCR subissent un réarrangement pour qu’à la fin de cette phase TCR sera exprimé.

➔Les thymocytes a TCR quitte le thymus : Les Lymphocytes T

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TCR (y, delta) ➔ CD4- CD8 - ➔colonise les cellules épithéliales ➔ Les lymphocytes intra épithéliaux TCR (alpha/ Béta) ➔ exprime CD4 et CD8 et deviennent double positif, poursuivent leurs maturations au niveau du Thymus, ils vont faire l’objet de 2 étapes de sélection : La sélection positive et la sélection négative a) La sélection positive : - Les thymocytes qui interagissent avec le CMH self avec forte ou faible affinité, meurent par apoptose ou délétion clonale. - Seuls vont survivre les thymocytes ayant interagi convenablement avec le CMH self. - Les cellules sauvegardées seront simple positive Pour le CD4 ou pour le CD8, Poursuivent la maturation et passent la sélection négative. b) b) La sélection négative : - Les thymocytes qui réagissent contre les peptides du soi sont éliminés par apoptose ou délétion clonales. - Les thymocytes qui ne réagissent pas contre les peptides du soi sont sauvegardés (sélectionnés) et peuvent quitter le Thymus. - Ils quittent le thymus pour aller se localiser au niveau des OLII au niveau des aires T dépendantes : ➔Pulpe blanche du thymus + Zone para corticale des ganglions lymphatiques. III-LE PHENOTYPE DES LYMPHOCYTES T (AU REPOS): Les LT naïfs au repos expriment un certain nombre de molécules : Le complexe : TCR (α,β)/ CD3 - Les molécules d'adhésion cellulaire qui sont les corécepteurs d’activation : - Le CD4 ou le CD8 - Le CD2, CD5, CD7 - Le CD28 - Le CD45· C045RA - L’ICAM, LFA, VLA - Les récepteurs pour tes cytokines IL1- R, ll2-R. IL4-R. IL12-R. - Les récepteurs pour les mitogènes : - La Concavaline A (Conca-A), - La phyto hémagglutinine (PHA).

Les Lymphocytes T

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Ces molécules sont capables d'activer les LT sans tenir compte de leur spécificité antigénique. IV. L'ACTIVATION DES LYMPHOCYTES T : deux signaux sont indispensables : -L’interaction T-CPA implique : le 1er SIGNAL D'ACTIVATION : Une liaison entre le TCR / CD3 et le CMHpp d'une part et entre le CD4/CD8 et le CMH II / CMH I 2ième SIGNAL D'ACTIVATION : L’intervention des molécules de costimulation : - CD28-CD80 - CD28- CD86 - CD2 - CD58 - LFA1- lCAM1 - L'ensemble de ces interactions dont le chef de fil est la liaison du CD28 –CD80 et du CD28 - CD 86 2) L'ACTIVATION DES LT: -Le contact T-CPA ➔l'activation des enzymes : les Protéines Tyrosine Kinases (PTK) « grâce au ITAM » ➔cascade de phosphorylation ➔ l'activation des facteurs de transcriptions nucléaires et a l’activation de gènes. V. LE PHENOTYPE D’ACTIVATION DES LYMPHOCYTES T : - Le CD25 la chaîne α du récepteur de l’IL2 - Les molécules du CMH Il - Le CD40L - Le CTLA4 / CD152 - Le CD71 récepteur de la transferrine - Le CD49a: chaîne de VLA1 qui est un récepteur pour la laminine. VI. LA FONCTION HELPER DES LYMPHOCYTES T ACTIVES : - -Le LT CD4 est alors appelé LT helper (THO) Il se différenciera (en fonction du micro environnement de présentation) en : TH1 ou TH2

Les Lymphocytes T

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LA FONCTION DES LT HELPER 1 LA FONCTION DES LT HELPER DE (TH1) TYPE 2 (TH2) =La voie de l’immunité cellulaire = la voie de l’immunité humorale Sécrètent : l’IL2 qui : Secrètent : IL4, 5, 6, 10 ➔induit la prolifération -Entre en interaction avec les LB lymphocytaire des clones -Le signal le plus important est sélectionnés par l'Ag. délivré par le CD40➔permet leur différenciation du CD40L (permet d’obtenir le « LT CD8+ pré cytotoxique en LT switch ») CD8+ cytotoxiques (CTL). Cette voie aboutit a la production : Secrètent aussi : IFN gamma, TNF Ig alpha IV-LES SOUS POPULATIONS LYMPHOCYTAIRES T: -Il existe plusieurs sous populations lymphocytaires T. Selon les molécules de surfaces exprimées l’on distingue : Les LT à TCR (α,β): Les LT â TCR (y, delta) : -Parmi les LT a TCR (α, β)/CD3 on - sont CD4 - et CD8 – compte : - ils expriment les récepteur Killer -les LT CD4+ et les LT CD8+. inhibiteurs et activateurs à -Les LT CD4 se subdivisent en : l'image des cellules NK (NKR.) -Ce sont des LT effecteurs, LT CD4 LT CD4 cytotoxiques qui constituent les conventionnels régulateurs lymphocytes intra épithéliaux (Treg) (IEL) -expriment le -expriment le - jouent un rôle important dans CD25 CD25 et le l'immunité des muqueuses. seulement CTLA4 de Les Lymphocytes T

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après activation

façon constitutive -répriment toute réponse immune dirigée contre les antigènes du soi -intervient dans la prévention de l'apparition des maladies auto immune Exercent leur action par : la sécrétion de IL10 et le TGFβ

Bonus : • LT activé va libérer : B Cell Growth factor (BCGF), un inhibiteur de la migration des macrophages (Fac MIF), IL2, INF gamma • Piège classique : - LT ne produit pas l’IL1 : libéré par les macrophages - Les LT ont un récepteur pour La Fraction FC d’IgG - Les R- d’Ag de LT : Ont une ST en domaine - -Les LT mémoires migrent dans la Moelle osseuse - -LES CELLULES CD4 : PEUVENT JOUER LE ROLE DE CELLULES T CD8 ‘’cytotoxique ‘’ à travers le système FAS-FAS ligand !!!! • Les LT jouent un rôle majeur dans la défense contre les infections intracellulaire ➔ Car elles activent les macrophages ➔ qui sont avec les PNN ceux qui luttent le plus contre ce genre d’infection. • LE TCR : - Formé par 2 chaines différentes qui appartient a la super famille des Ig, reliés par un pont disulfure - Contient des idiotypes - Se Lie au CD3 Les Lymphocytes T

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- Contient des zones variables et zones inchangées - Joue un rôle dans l’activation des LT. • Cytotoxicité cellulaire dépendante d’AC ➔ ADCC : - Cellules impliquées : NK, éosinophiles, Macrophages - A travers : IgG, IgE seulement - Pas de restriction par le CMH. Au cours de la réaction immunitaire : • Les LT deviennent des IMMUNOBLASTES, les LB des PLASMOCYTES • L’IL3 stimule les cellules des lignées myéloïdes pour donner : Basophiles, éosinophiles, monocytes, PNN ➔Particularité du sujet âgé : • Diminution globale des fonctions CD4, CD8 (réponse in vitro aux mitogènes, la cytotoxicité T, la réponse anticorps envers les antigènes dépendants) • Augmentation de la fréquence des pics monoclonaux

➔LES CD4 :

• Sont des glycoprotéines globulaires monomériques apparaissent très tôt durant la maturation intra thymique.

qui

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Les Lymphocytes T

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CMH et implication en clinique I-Transplantation d’organes : Selon la relation génétique liant le donneur (D) et le receveur (R), on distingue : - L'autogreffe ou greffe autologue : le D et le R sont le même individu (ex : greffe de peau) - L'isogreffe ou greffe syngénique : le D et le R sont génétiquement identiques. - L'allogreffe ou greffe allogénique : le D et le R sont de la même espèce mais génétiquement différents. - - La xénogreffe ou greffe xénogénique : Le D et le R sont d’espèces différentes.

-Tout greffon différent du receveur est rejeté, Le rejet est immunologique et transférable par : • Des lymphocytes (même ligné) • Ou par le sérum  Receveur immunodeficient ➔pas de rejet. - Le rejet : Réponse immune du receveur contre les molécules (glycoprotéines : S/f d’Ag de transplantation ou Ag de CMH) exprimées a la surface du greffon qui sont différentes ++ - Le rejet de greffe a été classé en hyper aigu, aigu et chronique 1-Mécanismes de la réponse immune à l'allogreffe : - Dirigée contre des épitopes de molécules HLA de classe I et de classe Il. Qui sont présentés par les CPA (cellules dendritiques) du donneur (résidentes dans le greffon) en premier lieu (survive peu de temps) ensuite par les CD du receveur

CMH et implication en clinique

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- Initiée par l'activation de clones lymphocytaires TCD4+ et TCD8+ et LB naïfs du R. - La sensibilisation vis-à-vis de l'allogreffe s'effectue dans les tissus lymphoïdes du receveur où vont migrer les cellules dendritiques du donneur. - Dans le cas des organes : Organe non vascularisé (greffe de peau) -Les CD empruntent les vx lymphatique -allant vers les gg lymph drainant l’allogreffe

Est à l’origine De

Impliqué :

CMH et implication en clinique

Organes vascularisé (Foie, Coeur, Reins) -CD empruntent la voie sanguine -Allant vers la rate -Vont se concentrer dans les Zones T-dépendantes en association avec des LTCD4+

Présentation des Ags Directe Indirecte -Reconnaissance par -Reconnaissance par les lymphocytes du R les Lym du R -des peptides allo -Des peptides allo géniques non apprêtés géniques apprêtés - portés par les cellules -portés par les CD du R dendritiques du D. -Réponse moins intense -1er vague de -dura aussi long tps stimulation que le greffon est en allogenique place -D’une réponse -Génération d’allo-Ac allogénique intense anti HLA du donneur -Génération de LT cytotoxique spécifique de l’allogreffe et réponse type HSR

Dans le rejet aigu Rejet chronique cellulaire : fréquence élevée entre 1015eme jour ➔réversible sous tt adéquat

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2-Action effectrice des LT cytotoxiques (LTc) : Nécessite la reconnaissance par les LTc de peptides allogéniques issus de molécules HLA I et HLA II à la surface des cellules cibles. Les LTCD8+ : Les LTCD4+ : Activité cytotoxique par la Apoptose par réaction type : Fas libération d'enzymes : la perforine (surface de la cellule cible)- Fas et la granzyme B. ligand (LT activée) 3-Action effectrice des cellules NK : Guidée par Les AC anti HLA type IgG ➔ phénomène d’ADCC 4-Actions effectrices de l'inflammation : Par l’IFNγ qui active les macrophages locaux. 5-Rôle des anticorps : Les anticorps anti-HLA jouent un rôle important dans : - Le rejet hyper-aigu vasculaire/ le rejet aigu vasculaire / le rejet chronique.

Le rejet hyper aigu vasculaire -QLQ MIN a QLQ HEURES. -Rejet à médiation humorale. -Du a l'existence chez le R d’AC circulants type lgG préformés (immunité préexistante) dirigés contre les antigènes HLA I portés par le greffon (cellules endothéliales du greffon). Ou AC type IgM anti ABO -Du a une réaction immunologique antérieure à

Le rejet vasculaire chronique: -QLQ jours à QLQ -Se déroule sur semaines après la plusieurs mois transplantation à plusieurs années. (1mois) -Rejet à médiation -Rejet à médiation cellulaire + humorale cellulaire + humorale - d'étiologie multiple -En absence mais avant tout d’immunosuppression immunologique. -constitue la -se traduit par une principale cause altération lente, d’échec précoce de la progressive et greffe. irréversible du - ce rejet ne met pas greffon en l’absence en jeu une immunité de causes déjà existante. mécaniques ou -Les tt infectieuses, immunosuppresseurs conduisant à une actuels sont perte progressive de principalement l'architecture du

CMH et implication en clinique

Le rejet aigu

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l'occasion d'une transfusion sanguines, d’une transplantation ou d’une grossesse antérieures. 1- fixation des AC anti-HLA du R sur les cellules endothéliales vasculaires du greffon. 2- activation du complément (voie classique) = » lésion directe des cellules endothéliales par le CAM (Complexe d’Attaque Membranaire) + afflux des PNN et leur activation -Les cellules endothéliales lysées secrètent des facteurs de coagulation favorisant l'agrégation des plaquettes. -Ce phénomène a pour conséquence une thrombose des vaisseaux irriguant le greffon ce qui conduit à une nécrose ischémique du greffon. -Le rejet hyperaigu n’est pas un accident

destinés à prévenir et réduire le rejet aigu dû aux LT. - Les lésions induites par les Ac sont beaucoup moins sensibles au traitement. -Les LB reconnaissent directement les antigènes du greffon grâce à leur BCR

CMH et implication en clinique

greffon qui devient le siège d'une fibrose et une artériosclérose (obstruction progressive des vaisseaux du greffon) - une infection par le CMV peut initier ce rejet. -Les lymphocytes T sont responsables de ces deux types de lésions -Avec l’amélioration du traitement du rejet aigu, le rejet chronique est devenu la cause principale des échecs de transplantation. Dans l'ensemble des cas, l'unique traitement du rejet chronique est la retransplantation avec un risque de récidive accrue sur le deuxième greffon. -Le meilleur traitement est avant tout préventif par le diagnostic et le traitement précoces des épisodes de rejet aigus et la lutte contre les autres facteurs de risque de la maladie athéromateuse 47

fréquent en transplantation clinique, car chaque receveur est testé par compatibilité croisée ou crossmatch. - Cependant, le rejet hyper aigu constitue l’obstacle majeur à la Xéno transplantation. NB : on ne peut pas prévoir un rejet dans les 48-72H avant que la créatinémie commence à chuter. • Pour mettre en évidence l’Ag HLA on effectue : une lymphocyototoxicité : se fait sur des lymphocytes du sang périphériques, on ajoute des Ac qui reconnaitront le HLA a la surface de ces lymphocytes ➔ induit une activation du complément ➔ complexe d’attaque membranaire ➔ pénétration de l’éosine ➔ reconnaissance de lymphocytes avec HLA 1 a la surface. Remarque : Maladie du greffon contre l'hôte : GVH : graft versus host disease. Complication fréquente et grave des greffes de moelle osseuse allo génique ➔ principale cause de mortalité de la greffe de MO. -Peut s’observer aussi suite à une transfusion sanguine Nb : la greffe doit etre effectuer par voie iV pour que la GVH puisse s’installer. ➔Mécanisme : -Elle est générée par les cellules immunocompétentes de la moelle osseuse du donneur qui vont attaquer l'organisme du receveur, incapable de les rejeter du fait de l'immunodépression induite avant la greffe (conditionnement du receveur par suppression de sa moelle et de sa mémoire immunitaire). ➔Les organes cibles de la GVH aiguë : peau, tube digestif et le foie (les canalicules biliaires), poumons. - la GVH est dite aiguë : avant 100 jours post-greffe - la GVH chronique : >100 jours post greffe

CMH et implication en clinique

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-Les poussées de GVH chronique n'ont pas obligatoirement de caractère récurrent et régulier. Elles surviennent plutôt de façon sporadique et imprévisible. -Une GVH chronique peut apparaître sans qu'il y ait eu auparavant une GVH aiguë II- Exploration A-Bilan immunologique du receveur :

a) Groupage ABO b) Groupage HLA : A, B, DR : B> DR> A> C (C est très peu Immunogène) c) Suivi de la première immunisation : Il est important de vérifier avant toute transplantation, l'absence d'anticorps anti-HLA (transfusion, grossesse ou greffe antérieure). d) Cross Match (CXM) pré transplantation: - Epreuve obligatoire. - C'est un test de micro lympho-cytotoxicité dépendant du complément ➔Technique : incubation des lymphocytes du donneur avec le sérum du receveur. -détectant la présence d'IgM ou d'IgG (AC anti antigènes HLA I et HLA II du donneur.) - Il est réalisé en faisant réagir le ou les sérums du R avec les lymphocytes du donneur. - Le CXM anti-HLA de classe I doit être obligatoirement négatif. En cas de positivité il ya un risque de rejet hyper aigu. C'est une contreindication formelle à la transplantation. e) Recherche d'anticorps antiviraux (sérologies virale) : - Anti-HTLV I et Il/ Anti-CMV/Anti-Herpes/ Anti-EBV/Anti-HBV et HCV/Anti-HIV B-Bilan immunologique du donneur :

a) Groupage ABO b) Groupage HLA-A, B, DR c) Sérologies virale. Bonus : - La greffe de rein nécessite seulement une compatibilité ABO ➔ c’est l’incompatibilité qui entrainera le plus rapidement le rejet de greffe. • Le groupe HLA code aussi pour : - C2, C4, Properdine - 21 hydroxylase

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CMH et implication en clinique

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Le système HLA I-CMH - Complexe : Contient plus d’une centaine de gènes. - Majeur : Leurs produits sont à l’origine de différences allo géniques importantes entre individus de même espèce. - D’histocompatibilité : Ces différences allo géniques sont responsables de phénomènes de rejets de greffes entre sujets histo-incompatibles. - Chez l’Homme le système CMH est appelé complexe HLA (Human Leukocytes Antigen) • Les antigènes HLA : sont des allo antigènes propre a chaque individu II-STRUCTURE GENERALE DU COMPLEXE HLA : • Le complexe HLA est un ensemble de gènes localisés sur un segment du bras court du chromosome 6 « bande p21.3 » - Les gènes HLA sont regroupés en deux régions principales (régions HLA classe I et II) dont les produits diffèrent. - Entre ces deux régions existe une troisième région (région HLA classe III) dont les gènes ne codent pas pour des molécules HLA.

Région HLA classe 1 -Position Télométrique -Contient environ 20 gènes dont les principaux sont : - Les gènes HLA A, HLA B, HLA C ➔Codant pour les molécules d’HLA I classiques : Le système HLA

Région HLA classe 2 -Position centromérique -Contient environ 32 gènes dont les principaux sont : - Les gènes HLA DR, - Les gènes HLA DQ, - Les gènes HLA DP Codant pour les molécules

Région HLA classe 3 -Situé entre les loci B et DR Contient environ 30 gènes Codant pour des molécules qui interviennent dans la réponse immune (C2, C4, FB, TNFα...) et pour les protéines du 51

HLA A, B et C HLA II (chaine a et B) ➔Non classiques : HLA E, F, G et H -Des gènes apparentés à la classe I : comme les gènes MIC (MHC class related gènes)

choc thermique (Hsp 70) ➔Ces gènes n’ont aucun rôle dans la présentation des peptides antigéniques et seuls les gènes de classe I et II codent pour les antigènes d’histocompatibilité

III-CARACTERISTIQUES DES GENES HLA : 1. Polymorphisme extrême du HLA : du au fait que chaque gène est multi-allélique 2. Transmission autosomale codominante : implique que chaque allèle porté par chaque haplotype est exprimé et son produit protéique est détecté • Chaque individu se caractérise par 2 Haplotypes HLA : l’un d’origine maternel, l’autre d’origine paternel ➔ la somme des 2 haplotypes définit le génotype. • Ségrégation extrêmement dépendante au cours de la méiose • Au total le phénotype HLA comprend : - 6 Antigènes classe 1 - 2 antigènes DR - 2 antigènes DP - 2 antigènes DQ 3. Liaison étroite : • Les Loci HLA A, B, C, DP, DQ, DR sont différents, mais étroitement liés sur le même chromosome➔ la transmission se fait en bloc ainsi la probabilité pour 2 enfants d’une même fratrie d’être : - HLA identique : 25% - Semi identique : 50% - Différent : 25% 4. Déséquilibre de liaison : • Tout allèle d’un locus HLA peut être associé a n’importe quel locus ➔ diversité très grande (10 puissance 14, IV-ORGANISATION GENETIQUE ET STRUCTURE MOLECULAIRE : Gènes et molécules de classe I Gènes et molécules de classe II Le système HLA

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- Appartenant à la superfamille Glycoprotéines des Igs transmembranaires -elles sont formées par -formées de 2 chaines l’association non covalente : polypeptidiques : α et β codés par D’une chaine lourde α les gènes du CMH comportant polymorphique (formée de 3 chacune 2 domaines domaines extracellulaires α1, α2, extracellulaires, une région α3) + domaine intracellulaire. transmembranaire et un domaine ➔ Codé par les gènes du CMH intracellulaire. associées de façon (HLA A, B, C) non covalente à la membrane NB : l’allogénie est portée par les cellulaire. chaines lourdes alpha (car Le peptide immunogène est polymorphiques) présenté aux lymphocytes TCD4+. -et d’une chaine légère b. Les gènes : β2microglobuline -Des gènes A (DRA, DQA, DPA) EXTRACELLULAIRE non qui codent pour la chaine α. polymorphique, QUI -Des gènes B (DRB, DQB, DPB) qui N’EST PAS CODE PAR LE GENE DU codent pour la chaine β CMH !!!!! -Le récepteur T reconnaît le peptide niché dans la cavité α1 et α2 et une partie de la molécule HLA et le corécepteur de la classe I CD8 se lie au domaine α3. NB : la structure du gène est organisée en 8 exons séparés par 7 introns V-DISTRIBUTION TISSULAIRE DES MOLECULES HLA

HLA de classe I : -Expression ubiquitaire

Le système HLA

HLA de classe II -Expression restreinte à certaines cellules : 53

-Elles sont exprimées à la surface de la plupart des cellules nucléées. -Les lymphocytes et les plaquettes en représentent une source importante. -Leur expression est augmentée par : L’INFα, β, γ et le TNFα.

-Elles sont exprimées de :

Façon Après constitutive activation : sur : -CPA : CD, LB, -Sur Macrophage l’endothélium -Cellules : vasculaire myéloïdes, de -Sur les LT l’épithélium thymique -Elles ne sont pas exprimées : Sur les plaquettes ; fibroblastes, cellules de kupffer -Leur expression est augmentée par L’INFγ, le TNFα et β, IL-4, IL-13 et le GM-CSF -Diminuée par le PGE-2. VI-ASSOCIATION HLA ET MALADIES : Choriorétinopathie A29 Spondyloarthropathie B27 Maladie de Behçet B51 Narcolepsie DR2 DID DR3, DR4

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Le système HLA

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Cytokines et chimiokines I-Les Cytokines : • C’est un groupe de médiateurs glycoprotéiques de faible PM (1560KD) • Solubles, synthétisées par les cellules du système immunitaire et d’autres cellules. • La sécrétion est brève de courte durée • Agissant à distance (endocrine), paracrine ou autocrine, par l’intermédiaire de Récepteur membranaires spécifiques, mais ce sont des médiateurs non spécifiques d’Ag • Pléiotropisme : une cytokine peut agir sur plusieurs tissus et plusieurs cellules au même temps • Redondance : des cytokines différentes peuvent avoir des actions identiques • Notion de cascade : une cytokine entraine la sécrétion d’autres cytokines. • La notion de synergie • Les lymphokines peuvent être préformés ou néoformés par les LT activés. 1-Nomenclature : Lymphokines Produites par les lymphocytes T Monokines Production exclusive par monocytes /macrophages Interleukines Support de communication entre les cellules immunocompétentes Cytokine Désignation plus générale concernant Les molécules de signalisation impliquées dans la réponse immunitaire. Récepteurs des cytokines : Complexes transmembranaires multi protéiques classés en 5 familles : 1- Les récepteurs de type I= récepteurs des hématopoietines 2- Les récepteurs de type II= récepteurs aux interférons 3- récepteurs de type III= récepteurs aux TNF 4- Les récepteurs de type IV = récepteurs de la superfamille des immunoglobulines Ils sont organisés en domaines immunoglobulines-like 5- Les récepteurs des chimiokines

Cytokines et chimiokines

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➢ Voies de transduction des signaux : - La grande majorité des récepteurs des cytokines sont dépourvus d’activité tyrosine kinase intrinsèque++ - Pour transduire les signaux émis par la cytokine, ils ont recours au recrutement de tyrosines intracellulaires : Src, JAK, JAK STAT (principale voie de transduction empruntée par la plupart des cytokines) ➔Elle implique les protéines tyrosine kinase JAK ainsi que les facteurs de transcription nucléaires STAT (Signal Transducer and Activator of Transcripton). II-Sources cellulaires de cytokines au cours de la réponse immunitaire et la polarisation TH1/TH2/TH17 : - -Au cours de la réponse immunitaire, le lymphocyte T, surtout CD4+, représente la principale source de cytokines ; elles sont produites suite à une stimulation antigénique ou mitogénique. Deux types de LTCD4+ helper : Les lymphocytes T •Les lymphocytes T helper 1 = LTH1 helper 2 = LTH2 : Induit par l’IL12 l’IL4 Produisent IL2, l’IFNγ IL4, IL6, IL10, IL13 • IL6 induit la prolifération et la différenciation des LB. Rôle Activation des Réponse a IgE macrophages Réaction Réaction d’hypersensibilité d’hypersensibilité immédiate Retardée Prolifération des LB IMMUNITE Cellulaire Cellulaire Humorale NB : C’est L’IL1 produit par les macrophages qui active les LT. • L’IL3 N’INTERVIENT PAS DANS LA REPONSE IMMUNE - Ces deux sous populations dérivent d’une même cellule dite TH0 ayant la capacité de synthétiser simultanément les cytokines de type TH1 et TH2. - La différenciation en l’une ou l’autre des deux sous population est fonction de la nature du stimulus antigénique. +++

Cytokines et chimiokines

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1-Classification fonctionnelle des cytokines A-Les cytokines pro-inflammatoires

IL1

Source Cellulaire Monocytes Macrophage Cellules Dendritiques

IL6

-Monocytes, CD macrophage, LTH2 -Cellules Endothéliales TNF Monocyte Alpha Macrophage Cellules Dendritiques

Cytokines et chimiokines

Fonctions biologiques Agit sur les hépatocytes ➔ synthèse de protéines aigues de l’inflammation •Agent pyrogène et anorexigène. •Augmente l’activité pro-coagulante et l’adhérence des leucocytes dans les cellules endothéliales •Active les LT, LB et macrophages >> synthèse de cytokines. • Résorption du tissu osseux par activation des ostéoclastes et active l’hématopoïèse dans la MO. • diminue l’activité de la LPL dans le tissu adipeux •Augmente la production des corticostéroïdes par les glandes surrénales. • exerce en plus de son activité proinflammatoire (le mm que IL1) - une action sur les LB >> différenciation en plasmocytes et maturation de ces derniers >> synthèse d’Ig (voie humorale) ➢ Première cytokine libérée au cours des processus inflammatoires. • augmente l’activité cytotoxique des NK et des LTC • faible activité antivirale, anti parasitaire et anti-tumorale.

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➢ Les cytokines de la réponse immunitaire spécifique :

IL2 : partage la majorité de ses fonctions biologiques avec l’IL15.

Essentiellement par le LTH1.

IL4 : -production d’IGE

LTH2, les mastocytes et les Basophiles

IFN gamma

LTH1 et macrophage.

IL10

Cellules dendritiques et monocytes macrophages.

Cytokines et chimiokines

•Essentiellement Voie cellulaire : - Prés CTL ➔ CTL - Augmente l’activité cytotoxique des NK (voie inée) - Prolifération de LTCD4+ • Prolifération des LB et production d’Ig • Role majeur dans la prolifération des plasmocytes • Différenciation des LTH0 en LTH2 • Inhibition de la voie TH1. • Agit sur les LB : prolifération • Rôle majeur dans le switch : IgM IgE • Agit aussi sur la maturation des basophiles Différenciation des LTH0 en LTH1 avec inhibition de la voie TH2. • active les cellules NK et les CTL. • active les macrophages et augmente leur synthèse en dérivés oxygénés. • augmente l’expression des molécules CMH. • faible activité antivirale. • faible activité antivirale. IL10 cellules dendritiques et monocytes macrophages. Synergie avec l’IFNγ, différenciation des LTH0 en LTH1 avec inhibition de la voie TH2.

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• prolifération des LTH1 et des cellules NK et augmente leur synthèse d’IFNγ. • Elle augmente la cytotoxicité des cellules NK. IL12 LTH2 Agit sur le LTH1 et le macrophage >> diminution de la synthèse des cytokines pro inflammatoires et de l’IFNγ cytokine anti-inflammatoire et immunomodulatrice. • maturation des LBs en plasmocytes. NB : Les cytokines de la défense antivirale : IFN alpha /IFN beta (#IFN gamma ➔ augmente l’expression de l’Ag). • Les cytokines de l’hématopoïèse : IL3 ; IL5 (d’origine essentiellement mastocytaire) ➔ différenciation des progéniteurs médullaires. Cytokine de l’immunité innée Immunité adaptative Produits par les NK et les CPA se colle à la LT helper : macrophages : - Produit IL 2 -LTCD4 : produit : • IL1 IL2 • TNF alpha IL4 • Chimiokine • Ensuite libération du IL12 et IFN IFN gamma gamma : Pour activer les macrophages IFN gamma et IL12 sont Retrouvés dans l’immunité innée et adaptative !!! NB : IL12 active les NK et les Cellules cytotoxiques !!! 2-LES CYTOKINE INFLAMMATOIRES ET ANTIINFLAMMATOIRES :

Cytokines Inflammatoire Cytokines et chimiokines

Cytokines anti-inflammatoire 59

-IL1 -IL6 -IL12 (Active TH1 et NK) -TNF ALPHA /BETA -MIF

Interféron alpha Interféron beta

Interféron gamma (interféron 2 ➔ dit immun➔ lymphokine) -Produit par : NK, TH1, LT CD8

-IL4 -IL10 (bloque les macrophages et les CD, produites par les LT reg) -IL13 NB : IL 1 RA (antagoniste de IL1 = médicament) - Anti bactérien et anti viral - Action : inhibe la réplication virale : état antiviral Augmente l’expression de CMH1 donc de l’activité cytotoxique Active les cellules NK -Augmente la présentation de l’antigène -Augmente la présentation de l’Ag -Stimule les macrophages

TH0 IL2, IL4, INF GAMMA TH1 IL2 ; INF GAMMA, TNF ALPHA, TNF BETA TH2 IL4 ; IL 5, IL6, IL 10, IL 13 - L’INF gamma et IL13 active les macrophages. - IL5 active les éosinophiles.

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Cytokines et chimiokines

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Les molécules d’adhésion Cinque principales familles : sélectines/ intégrines/ mucines/ cadhérines / superfamille des immunoglobulines. Les selectines Les CAMs de la Les integrines mucines superfamille like des IG -Sur -Les ICAM.. -Constitutives sur les Constitutive induite leucocytes leucocytes +++ Sur les Induite par -Sur Glycoprotéine -Glycoproteines leucocytes histamine, Plaquettes riche en transmb liée au L-selectine thrombine Cysteine cytosquelette de la Sur C ➔1 ou cellule Endothéliales plusieurs -interagit de façon non E-selectine domaines Ig covalente P- selectine like -les integrines -Glycoprotéine trans-mb interagissant interviennent au cours -Domaine lectine Like avec Les de l’adhérence ferme -domaine d’homologie avec integrines =au cours de la réaction EGF inflammatoire -P-selectine stockée dans les Exp : LFA, VLA grains de weib palade -E-selectine est exprimé suite a la synthèse de IL1 /TNF alpha NB : Migration trans Epithéliale : Nécessite des molécules d’adhérence cellulaire : SELECTINE (SELECTINE-L ➔SELECTINE P), INTEGRINE superfamille des Igs • Trois étapes : Rolling ➔ adhésion ferme ➔ migration transendothéliale 1- Le roulement : Rolling : - Les cellules endothéliales activées : expriment les P-sélectines et Esélectines, secrètent les chimiokines IL-8 … 2-L’adhérence ferme / sticking : -L’interaction entre chimiokines et récepteurs >> activation des intégrines >> liaisons avec les molécules de la superfamille des Ig (ICAM). Les molécules les plus concernées sont :

Les molécules d’adhésion

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Leucocytes (integrines : exprimée d’une façon constitutive)

Endothélium (Ig LIKE ➔ expression suite à l’état d’inflammation) LFA1 ICAM1 LVA1 VCAM1 L’ADHERENCE ICI EST IRREVERSIBLE

3- La migration trans-endothéliale : Les leucocytes traversent la paroi vasculaire par : Diapédèse : Passage entre deux endothéliales.

-Emperipolèse cellules Passage à travers la endothéliale

cellule

➢ Pathologies : déficit en molécules d’adhésion LAD (Leucocytes adhésion deficiency ): 1. LAD I : - défaut d’expression de la chaine b (CD18) - retard de chute du cordon ombilical - infections bactériennes sévères - défaut d’adhésion des PNN et des Mn - mort dès l’enfance

Les molécules d’adhésion

2. LAD II : -anomalie de la fucosyl transférase >> déficit d’expression du ligand des sélectines >>> -défaut du Rolling. -adhérence normale

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Les molécules d’adhésion

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Réactions de précipitation et d’agglutination Si l’antigène est moléculaire et soluble les complexes Ag/AC forment un précipité ➔ Précipitation.

L’antigène est particulaire ou cellulaire (bactéries, hématies, billes de latex …) les complexes immuns forment un agglutinat ➔ Agglutination

Les principaux techniques antigènes anticorps : Nature de l’AC

AC natif AC marqué

Observation des effets de l’Ag-AC A l’œil nu »directe « Non visible a l’œil nu

Antigène soluble

Antigène particulaire ou soluble fixé sur un support Technique d’agglutination

Technique de précipitation Techniques : d’Immuno-dosages utilisant comme traceur Radio-immunologie Cyto-radioimmunologie ImmunoCyto-enzymoenzymologie immunologie Chimioluminescence Immunofluorescence

I-Les anticorps utilisables : Les anticorps utilisables : - obtenus par mélange de sérums d’un grand nombre d’animaux hyperimmunisés. Réactions de précipitation et d’agglutination

Des AC monoclonaux Qui sont mono-spécifiques.

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- Utilisés sous forme de fraction -Un sérum poly clonal est obtenu gamma-globulinique. en injectant de façon répétée un Les hybridomes : producteurs animal (généralement un lapin) d'anticorps monoclonaux, sont avec un antigène. obtenus par fusion de cellules - Le sérum obtenu peut contenir spléniques de souris, immunisées un titre très élevé d’anticorps par un antigène donné, avec des spécifiques de l’antigène. cellules myélomateuses murines -Cette approche est rapide et bon (cellules tumorales). marché. -Ces cellules (cellules spléniques - Une multitude d'épitopes sont de souris) ont été immortalisées, généralement recueillis. peuvent donc être amplifiées à volonté, et congelées pour un stockage à longue durée. II-LES REACTIONS DE PRECIPITATION : Technique qualitative Technique quantitative En milieu liquide : Test de l’anneau (ring -Néphlométrie test) -Turbidimétrie En Non Immuno diffusion Immunodiffusion milieu pulsée double sur radiale solide (passive) gel (Mancini) (gélifié) Pulsée Electro synérèse Electro(active) immunoélectrophorèse immunoquantification Immuno fixation (Laurell) Immuno sélection III-Les Techniques d’immuno-précipitation qualitatives La courbe de Heidelberg décrit le fait suivant : Excès d’AC -Complexes immuns sans formation de réseau

Zone d’équivalence Complexes immuns avec formation de réseau

Réactions de précipitation et d’agglutination

Excès d’Ag Complexes immuns sans formation de réseau

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- Immunoélectrophorèse : (Technique de précipitation qualitative) - Principe : Techniques en (2) temps : Dans un 1er tps : Dans un 2em Tps : ImmunoELECTROPHORESE : Précipitation Séparation des molécules -un antisérum est placé dans antigéniques grâce à leur une rigole parallèle au sens de différence de mobilité dans un migration des Ag. champ électrique. -Ag et Ac diffusent librement dans le gel -Donnent dans la région d'équivalence : des arcs (lignes) de précipitations précises (selon le même principe que l'immunodiffusion d'Ouchterlony) -RESULTAT : L'intensité, la forme et l'endroit des arcs de précipitation servent à identifier les protéines. ➔ Application : 1-Identification d’un composant monoclonal (préciser la classe et la sous-classe des Ig monoclonales en cas d’Immunoglobulinopathies monoclonales). 2-L'immunoélectrophorèse est appliquée en cas de suspicion de gammapathies mono- ou polyclonales.

Réactions de précipitation et d’agglutination

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-Immuno sélection : (Précipitation + Qualitative) •Principe : varient d’immunoélectrophorèse - Cette technique permet la détection de chaînes lourdes libres présentes en faible quantité dans des liquides biologiques. ➔ délai long : 3jours -NB : l'immunoélectrophorèse tend de plus en plus à être remplacée par l'immunofixation : qui est une variante méthodologique qui a l'avantage d'être plus rapide (délai de réponse en une journée), un peu plus sensible et en partie automatisable. IV-LES REACTIONS D’AGGLUTINATION : - Mettent en jeu un Ag situé a la surface d’une particule (soit naturellement soit synthétiquement) 2 - Deux types de techniques : Agglutination et -Agglutination et hémagglutination directes ou hémagglutination indirecte ou actives : passives : Les Ac dits agglutinants (IgM en Les Ac dits agglutinants (IgM en majorité) majorité) ➢ Les paramètres de réaction :

Les Ac dits agglutinants (IgM en non-agglutinants (IgG). majorité) -sont capables de produire une -incapables de provoquer une agglutination des particules en agglutination dans ces conditions suspension dans un milieu salin de [Na Cl] = 0,15 M. - Les Ag : il existe une relation entre l’agglutinabilité et : - Le nombre de sites antigéniques. - Leur localisation. A-gglutination active ou directe :

Résultat de : l’agglutination active d’un AC agglutinant (IgM>>>IgG) + Ag appartenant propre a la particule - Elle peut être :

Réactions de précipitation et d’agglutination

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Qualitatives : Méthode : Utilisation des immunsérums agglutinants mono ou poly spécifiques. But : identification antigénique Exemple : Sérologies bactériennes (ASLO)

Quantitatives : Méthode : dilutions croissantes de sérum avec une quantité fixe de suspension antigénique But : Sérodiagnostics. => Le titre du sérum étudié est donné par la dernière dilution du sérum ou l’on observe encore une agglutination - Exemple : Les sérodiagnostics les plus utilisés : -Sérodiagnostic de Widal et Felix dans les salmonelloses - Sérodiagnostic de Weil et Felix dans les brucelloses (et la rickettsie) - Sérodiagnostic de Martin et Petit dans les leptospiroses.

B-Hémagglutination et l’agglutination direct et indirect

Hémagglutination directe

-union spécifique entre un Ac agglutinant (IgM) et un Ag figuré appartient en propre à la particule (Ag naturellement porté par la particule). Technique Technique qualitative : Quantitative -Groupage Titrage des sanguin ABO hémagglutinines -Test de anti-A et anti-B Coombs selon les mêmes direct modalités que Diagnostic les des anémies sérodiagnostics. hémolytiques

Réactions de précipitation et d’agglutination

Agglutination & Hémagglutination Indirectes (ou passives) - L’Ag est fixé sur une particule support ce qui augmente grandement la sensibilité de telles suspensions ➔visualisation du phénomène par des quantités d’Ac et d’Ag beaucoup plus faibles que celles nécessaires pour la précipitation. On utilise comme support : -Particules de latex -Applications : Test de Coombs indirect : Diagnostic des anémies hémolytiques auto-immunes

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autoimmunes ➢

Comparaison COOMBS DIRECT ET INDIRECT :

COOMBS DIRECT -Ag fixé naturellement sur le Particule (GR) -La l’Ag est l’AC anti-D - l’Ac est une antiglobuline Technique : -Prelevement des GR du malade (déjà sensibilisé ) -on ajoute des AC anti-globulines reconnaissant la region FC sur les AC present sur les GR -Agglutination

COOMBS INDIRECT : -On va fixer l’Ag sur la particule (GR) -ensuite on ajoute l’Antiglobuline -incubation des GR dans le serum Humain -Complexe AC-Ag a la surface des GR -Ajout de l’antiglobuline après lavage des GR -agglutination car les GR sont sensibiliisés But : -Permet de depister les AC antiglobules rouges present dans le plasma.

Test du latex / Test de Waaler-Rose : intérêt : Dg de la polyarthrite rhumatoïde : Test du latex -une réaction d’agglutination passive Sur des particules de Latex ➔ intérêt : la mise en évidence, dans le sérum : du facteur rhumatoïde (FR) : Auto-anticorps (IgM) dirigé contre le fragment

Test de Waaler-Rose : -une réaction d’hémagglutination passive Réalisée avec des GR humains de groupe O Rh (-) sensibilisés à l’aide d’anticorps de lapin anti- GR humains (IgG) et qui donnent lieu à une hémagglutination en présence de facteur rhumatoïde d’isotype IgM.

Réactions de précipitation et d’agglutination

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Fc des IgG. - l'IgG est liée aux particules de latex. ➔Voir RHUMATO ➔ PR

Il permet donc le titrage sérologique de ce FR => L e titre correspond à l’inverse de la plus grande dilution donnant encore une réaction positive.

NB : le test d’immunofluorescence indirecte sur crithidia luciliae permet de detecter les AC anti DNA natif du lupus : LUCILIAE comme LUPUS avec le test DE FARR.

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Réactions de précipitation et d’agglutination

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Techniques utilisant un marqueur - Les techniques de marquage sont très sensibles et permettent donc de déceler des quantités faibles de la cible (Ag ou Ac). Méthodes par compétition : (RIA, EIA, FIA) Ajout d’un Ag marqué ➔ entre en compétition avec l’Ag à doser (possède les mêmes épitopes) -L’activité mesurée est inversement proportionnelle à la concentration de l’Ag présent dans l’échantillon ➔plus la concentration de l’antigène dosé est importante, moins l’antigène marqué sera fixé, et donc moins sera recueilli le signal de marquage.

Techniques utilisant un marqueur

Méthodes Sans compétition (Sandwich) : (IRMA, ELISA, IFMA) : Ajout d’un AC marqué ➔ fixé sur l’Ag à doser ➔ seront emprisonnés en SANDWICH entre 2 AC chacun (le 1er celui de la sonde, le 2e marqué) -L’activité mesurée est proportionnelle à la concentration de l’Ag présent dans l’échantillon. ➔plus la quantité de l’antigène dosable augmente plus le signal de marquage deviendra important.

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Méthodes directes et indirectes : Méthode directe -Anticorps marqué se fixe sur un antigène. -Ces méthodes permettent de doser des antigènes.

Méthode indirecte - l’anticorps marqué se fixe sur un autre anticorps non marqué, c’est ce dernier qui se fixe sur l’antigène (généralement fixé sur une sonde). -Ces méthodes permettent de doser des anticorps.

-Les techniques radio-immunologiques : -Les radio-isotopes sont des marqueurs très sensibles. -Techniques initialement développées pour le dosage d’insuline puis d’autres hormones. -Progressivement supplanté par d’autres marqueurs non isotopiques offrant une plus grande facilité d’emploi et sans restriction réglementaires liées à la manipulation des produits radioactifs. -Exemple 2 : RAST (Radio Allergo-Sorbent Test) : - Permet de rechercher les IgE spécifiques (non Totaux) d’un Antigènes donné. Spécifique d’un allergène donné. -UTILISE UN ANTIGENE Insolubilisé

Techniques utilisant un marqueur

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NB :

➢ -

RAST RIST IgE spécifique IgE totaux Les techniques Immuno-enzymatiques : Utilisent les enzymes comme traceurs. Introduits comme alternatifs aux radio-isotopes. Stables, catalysent des réactions irréversibles. Résistants aux interférences, et faciles à conjuguer sans perte d’activité.

Exemple 1 : ELISA Sandwich (Enzyme Linked Immuno-Sorbent Assay) :

Techniques utilisant un marqueur

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L’ELISA Est une technique sensible, rapide, adaptée à la réalisation de grandes séries de dosage, elle est très utilisée pour : le sérodiagnostic des maladies infectieuses et pour le diagnostic et le suivi de maladies autoimmunes. Principe du test ELISA : 1- Un antigène est couplé à une surface de plastique. 2- Un anticorps couplé de façon covalente à une enzyme est ajouté. 3- un substrat incolore de cette enzyme, converti par celle-ci en molécule colorée, est ajouté. 4- On mesure l’intensité de la coloration obtenue, Celle-ci est proportionnelle à la quantité d’anticorps fixé. 5- Ce dernier se fixe sur l’antigène recherché « ELISA direct », ou sur l’anticorps recherché « ELISA indirect » -L’ELISA sandwich : permet de mesurer la concentration d’une molécule donnée dans un fluide biologique, à condition de disposer de deux anticorps reconnaissant des épitopes distincts. - Techniques d’Immunofluorescence : - Utilise Un fluorochrome (une substance capable d’absorber l’énergie d’une source lumineuse et d’émettre un rayonnement d’une longueur d’onde supérieure.) - Il y a deux longueurs d’onde différentes pour chaque fluorochrome : une d’excitation et l’autre d’émission. - NB : Techniques d’Immunofluorescence (Tri cellulaire, Ex Cytométrie en flux) : - Résultats sous forme d’histogrammes ou de diagrammes 2D, où chaque cellule est représentée par un pont dont les coordonnées sont les intensités de fluorescence mesurées. - L’application : L’analyse des marqueurs de surface - Analyse des protéines intra cytoplasmiques après avoir perméabilisé les cellules. Techniques utilisant un marqueur

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- Elle permet aussi de trier les cellules en fonction des marqueurs qu’elles expriment. - Avantages : - Analyse quantitative et qualitative, Rapide, multiparamétrique, avec analyse d’un grand nombre de cellules - Techniques de chimiluminescence : • La chimiluminescence, est seulement caractérisée par un spectre d’émission (pas de lumière d’excitation). • La durée d’émission est variable d’une seconde à une dizaine de secondes permettant une lecture rapide. • Cette lecture est unique car l’émission lumineuse est fugace. Il est donc impératif que la lecture se fasse par un automate.

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Techniques utilisant un marqueur

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Hypersensibilité type I I-Généralités : - Les réactions d’hypersensibilité sont des réactions de l’immunité spécifique - Classification de GELL ET COOMBS : basée sur les mécanismes immunologiques effecteurs : Caractéristiqu es :

Type 1 (anaphylactique)

AC

IgE

Ag

Exogène

Surface cellulaire

Soluble

Tps de réponse Aspect

15-30 ‘’

Min à heures

3-8h

Papule et érythème

Lyse et nécrose

Erythème Œdème, Nécrose Complément et Neutrophile et AC + plaquettes + mastocytes

Histologie Mastocyte et Eosinophile Transférée par

Type 2 (cytotoxique)

Type

Type 3 (à complexes immuns)

4 (retard ée)

IgG, IgM

AC et complément

Les ANTICORPS

Aucun Tissus et organes 48-72h Erythème et Induration Monocyte s Et lymphocyte s Lymphocytes

-Anémie -SLE hémolytique du -Maladie du Test a - Allergie Exp : nv né poumon la -Rhume des foins D’éleveur Tuberculi -Maladie de Goodpasture D’oiseaux ne NB : la pénicilline est capable d’induire une réaction d’HS type : 1, 2, 3, 4 • Phénomène d’anaphylaxie cutanée passive : inj d’IgE intra dermique + inj de l’Ag propre à l’IgE injecté en iv.

Hypersensibilité type I

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II-La réaction d’hypersensibilité de type I (Immédiate ou anaphylaxie) : - ELEMENT DECLANCHEUR : un antigène exogène appelé allergènes (NON PARASITAIRE) - Réponse : Humorale a composante IgE III-Notion d’atopie : - -La prédisposition génétique (familiale) à produire des IgE en réponse à des antigènes de l’environnement (réponse anormale) ➔ Taux élevé d’IgE circulants + nombre élevé d’éosinophiles. - Ils ont tendance à développer une réponse TH2 (IL4, IL5). (Humorale) IV-Composants de la réaction d’hypersensibilité de type I : A-Les allergènes :

- C’est un antigène non parasitaire classé en : - Pneumallergènes (inhalés) / Trophallergènes (ingérés) / Allergènes transcutanés /Allergènes médicamenteux … B- Les anticorps IgE et leurs récepteurs :

• Type IgE • Récepteurs : a- Récepteur haute affinité : - En grand nombre sur les mastocytes, basophiles - En faible nombre sur les éosinophiles et les macrophages. b- Récepteur de faible affinité : - Sur les éosinophiles et les macrophages, plaquettes, LB, cellules de langerhans C-Les cellules :

Les principales sont : • Mastocytes (les plus importantes : retrouvées dans les tissus : Muqueuses, peau…) / Basophiles (1% des leucocytes sanguins) / Eosinophiles / Macrophages / PNN / plaquettes (activées libèrent les EICOSANIDES) 1- Mastocytes et basophiles : Dégranulation induite par : a. Liaison de l’Ag a l’IgE : déjà présent à la surface de la cellule ➔ PONTAGE DE 2 IgE b. Par la Substance P c. Les anaphylatoxines (C3a, C5a, C4a) Hypersensibilité type I

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d. Fixation directe médicamenteuse NB : Les mastocytes expriment : - CD40 ligand et sécrètent IL4 - EN ABSENCE DE LYM T : ils peuvent orienter la commutation isotypique des lymphocytes B et stimuler la synthèse d’IgE. D- Les médiateurs libérés :

Médiateurs préformés : Préexistant dans les grains avt l’activation des basophiles et mastocytes 1- Histamine : - Médiateur majeur de l’hypersensibilité T1 - Synthétisé par décarboxylation de l’histidine et libéré par dégranulation. - ½ vie : est inférieure à 10 minutes. -Secrété par : MASTOCYTES /BASOPHILES /Plaquettes NB : l’Histamine est toxique pour les parasites ! ➔Il se fixe sur des récepteurs spécifiques : 3 types de récepteurs ont été identifiés : H1, H2 et H3 ➔Ils ont une distribution tissulaire différente et leur couplage à l’histamine produit des effets différents. -La majorité des effets de l’histamine lors de la réaction allergique sont dus à sa fixation sur le récepteur H1 -Effet de la fixation sur H1 :

Hypersensibilité type I

Médiateurs néoformés : Après activation des basophiles et des mastocytes 1- l’acide arachidonique : est produit suite à l’activation des lipases et des phospholipases. L’acide arachidonique est alors métabolisé par : Voie de la Voie de la cyclooxygénase lipooxygénase : : Production de Production la des prostaglandine leucotriénes (Broncho (Broncho constricteur) constriction + constriction des muscles lisses intestinaux Effet similaire a celui de l’histamine, mais encore plus puissant+++ 2- Platelet activating factor (PAFacether) : - dérive des lysophospholipides - Active les plaquettes avec formation de micro-thromboses. 3-Cytokine :

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➔Contraction des muscles lisses IL3, IL4, IL5, IL13, TNF alpha, GMdes parois intestinale et CFS bronchique ➢ Augmentation de la perméabilité des veinules ➢ Une hypersécrétion de mucus par les cellules caliciformes. -EFFET de La fixation sur H2 : -Augmente la perméabilité vasculaire - la vasodilation et la sécrétion des glandes exocrines NB : La fixation de l’histamine sur les R- H2 sur les mastocytes et les basophiles provoquera l’arrêt de la dégranulation ➔ FEED BACK NEGATIF DE L’HISTAMINE SUR SA SECRETION. 2-Enzymes protéolytiques : comme la tryptase, et la carboxypeptidase. 3- Facteurs chimiotactiques : ECPA pour les éosinophiles et les neutrophiles 4- Héparine NB : molécules qui sont impliquées dans l’augmentation de la perméabilité vasculaire : - Histamine, sérotonine, fragments anaphyalatoxine du complément - Le système des kinines et leucotriéne ne semble pas influencer la perméabilité V-Mécanismes de l’hypersensibilité de type I : Se déroule en deux étapes : a- Phase de sensibilisation - Premier contact avec l’allergène. - capté par les CPA ➔ OLII ➔ et présenté aux Hypersensibilité type I

b- Phase effectrice - deuxième contact avec le même allergène. - qui va ponter les IgE préformées fixées se trouvant

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lymphocytes T CD4+ ➔ différenciation en TH2 ➔ Sécrétion de : IL4, IL10, IL13 ➔ synthèse d’IgE spécifique de l’allergène par les LB -Ces IgE se fixent par leur fragment constant : R- haute R- faible affinité affinité Mastocytes Macrophage Basophiles Eosinophiles Lym B Plaquettes

à la surface des mastocytes et polynucléaires basophiles. Ce pontage provoque : - une dégranulation : Libération des molécules préformées (Histamines, proteolytiques, chimiotactiques) - la synthèse de médiateurs dérivés de l’acide arachidonique et du PAF - la production de cytokines : IL-4, IL-6, TNF-α. -Les monocytes/macrophages, les polynucléaires éosinophiles et les plaquettes interviennent dans un 2ème temps essentiellement par l’intermédiaire des mêmes médiateurs. -Ils participent majoritairement à la phase semiretardée (≈ 6ème heure) de l’hypersensibilité immédiate. VI-Conséquences des réactions d’hypersensibilité de type I : a- Anaphylaxie systémique (Exp du choc anaphylactique) b- Anaphylaxie localisée : La réaction est limitée à un tissu ou à un organe spécifique cible : - Rhinite allergique (RHUME DES FOINS) - Asthme - Allergie alimentaire - Dermatite atopique (#ECZEMA de contact : HS type IV) - Urticaire4

Hypersensibilité type I

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VII-Exploration de l’état d’hypersensibilité de type I A- Eosinophilie sanguine > 300 cellules/ml B- Dosage des IgE totales : les indications de ce dosage sont limitées. C- Identification de l’allergène : 1- Tests cutanés à lecture immédiate : ➔Prick test : Lecture à la 15-20ème minute : mesure de la papule et de l’érythème. 2- Tests in vitro : 1- Recherche des IgE spécifiques circulantes : -Approche qualitative : utilise des tests multi allergéniques = tests de dépistage utilisant des mélanges d’allergènes -Approche quantitative : (RAST : de moins en moins utilisé), immunoenzymatique, fluorométrique ou par chimiluminiscence. 2 - Recherche des IgE spécifiques fixées sur les basophiles : Test pratiqué en cas de persistance des signes cliniques avec recherche d’IgE spécifiques non concluante ou discordance entre les tests cutanés et le dosage des IgE spécifiques. -Test de dégranulation des basophiles /Test de libération d’histamine / test d’activation des basophiles Nb : Désensibilisation : ➔Condition : réalisée uniquement avec des dérivés mono-allergéniques (les résultats obtenus en utilisant des mélanges d’allergènes sont médiocres). - -La désensibilisation consiste à administrer d’abord une faible dose puis des doses croissantes de l’allergène jusqu’à une dose d’entretien. - ➔Le but de provoquer : - Une modification de l’isotype d’Ig dirigé contre l’allergène : IgG4 remplaçant IgE - Une diminution du nombre de polynucléaires neutrophiles et de leur activité. Une diminution de l’activation des LT et LB Une normalisation de l’équilibre Th1/Th2 de la réponse immunitaire. ➔Médicaments innovants : Ac anti IgE. • Les extraits allergéniques adsorbés sont utilisés en immuno allergie pour la désensibilisation spécifique. • Au cours du phénomène d’anaphylaxie cutanée passive :

Hypersensibilité type I

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- Les IgE sont injectées par voie intra dermique - L’Ag est injectée par voie IV.

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Hypersensibilité type I

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CYTOTOXIQUE ➢ Anticorps : IgG ou IgM ➢ Antigène : surface cellulaire portant un Ag spécifique pouvant être un : - Elément constitutif de la membrane - Une Molécule adsorbée sur la membrane. Résultat : Les cellules cibles sont endommagées ou détruites à travers une variété d’opérations en relation avec : 1- Une lyse par le système du complément 2- Une cytotoxicité dépendante des anticorps ADCC : intervention des NK, sans complément 3- Une opsonisation (C3b, C3bi) : phagocytose par les macrophages 4- Un dysfonctionnement cellulaire dû à la fixation d’anticorps sans lésion : • Maladie de BASEDOW : fixation AC anti R-TSH (TSH-like) ➔ hyperthyroïdie • Myasthénie : Fixation AC anti R-ACH ➔ inhibition ➢ Mécanisme : Exposition de l’immunité a : 1. Des antigènes normaux : réaction croisée avec un antigène infectieux. 2. Des antigènes du soi modifiés : par liaison à des molécules médicamenteuses par exemple. - Les modèles les plus classiques sont :

Les allo immunisations

Manifestations auto immunes

• Maladie hémolytique du nv né • Réaction post transfusionnell e • Réponses post greffe

• Anémie hémolytique Cytopénie auto immune médicamenteus Thrombopéni • Sd de e e GOODPASTUR E • Thyroïdite • myasthénie

CYTOTOXIQUE

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A-Allo-immunisation

Fait suite à l’introduction dans l’organisme de l’un des allo-antigènes érythrocytaires ou leucocytaires. Survient dans 3 circonstances : 1. Grossesses → allo-immunisation foeto-maternelle (maladie hémolytique du nouveau-né). 2. Transfusions sanguines 3. Transplantations d’organes ou de tissus. 1- Allo-immunisation foeto-maternelle= MHNN par incompatibilité rhésus : Due à une incompatibilité foeto-maternelle secondaire à une alloimmunisation de la mère contre un des antigènes érythrocytaires du fœtus (Ag provenant du père et absent chez la mère). -Cette immunisation se produit lors d’une grossesse antérieure (des hématies foetales passent à - interruptions volontaires de grossesse - de fausses couches spontanées - transfusions sanguines incompatibles. -Les incompatibilités foeto-maternelles les plus fréquentes et les plus graves sont liées à l’allo immunisation anti-D (80 %). -On les observe lorsque la mère est Rh- et le père Rh+ mais on peut avoir d’autres incompatibilités plus rares avec une mère Rh + (anti-c, anti-E). - Le risque d’immunisation diminue : s’il y a incompatibilité ABO entre la mère et son enfant car la destruction des hématies fœtales dans la circulation maternelle est alors plus rapide grâce à la présence d’Ac naturels anti -A ou anti-B : la mère n’a pas le temps de s’immuniser contre les Ag étrangers érythrocytaires de son enfant (c’est le principe du traitement préventif). Mécanisme : Au cours de la première Au cours d’une seconde grossesse incompatible : grossesse Incompatible la mère développe des Ac de Qu’apparaît la MHNN lors de la type IgM ne traversant pas la réactivation immune avec barrière placentaire production d’IgG pouvant -il n’y a pas de MHNN chez une traverser le placenta. primipare sauf si immunisation -Leur passage trans placentaire préalable➔ Ne pas oublier : entraîne une hémolyse des hématies fœtales entraînant une CYTOTOXIQUE

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Elle peut s’immuniser suite a une anémie du fœtus associée FC ou a une transfusion quelques fois à une anasarque ultérieure foeto-placentaire. Traitement : Préventif Administration chez la mère après la naissance d’IgG anti Rh ➔Immunosuppression spécifique Curatif Exsanguino-transfusion -Diagnostic de la MHNN : tests de Coombs direct et indirect. Test de Coombs direct Test de Coombs indirect -Recherche des AC maternels sur -Recherche des Ac anti GR du la mb des GR fœtaux. foetus dans le sérum Maternel ➔On prélève le sang du cordon -On prélève le sérum maternel ombilical -On l’ajoute a des GR humains ➔ on ajoute des AC anti IgG non sensibilisés (pas du foetus ➔Si agglutination ➔ COOMBS ou du nouveau-né) direct positif -On mélange ces GR avec le ➔si négatif : absence d’AC anti sérum de la maman ➔ Si D a la surface des GR fœtaux présence d’IgG anti D ➔ agglutination ➔ COOMBS indirect positif 2- Réaction transfusionnelle par incompatibilité ABO : -Liée à des Ac naturels (préexistant dans l’organisme) -Réaction immédiate due aux IgM >> Activation du complément >> Hémolyse intra vasculaire >> Toxicité liée à l’hémoglobine libérée. 3- Rejet de greffe hyper aigu : (Voir cours implication du HLA dans le rejet de greffe)

B-Manifestations auto-immunes : 1- Anémies hémolytiques auto-immunes 2- Le syndrome de Good Pasture : (Voir les syndromes néphrotiques ➔ NEPHRO) 3- Anémie hémolytique induite par des médicaments : Les molécules du médicament sont adsorbées de façon non spécifique sur la membrane du GR formant un complexe haptène-porteur. Ce complexe induit la formation d’Ac qui se lient au médicament adsorbé sur le GR. Ces Ac entraînent soit la destruction du GR par le complément, soit sa capture par des phagocytes de la rate ou du foie. CYTOTOXIQUE

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Bonus : • les Ac responsable de l’hémolyse suite a un accident transfusionnel dans le groupe ABO sont des IgM, dans le cas d’un accident transfusionnel dans les autres sous-groupes, les AC responsables sont des IgG !!!!!

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CYTOTOXIQUE

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Hypersensibilité type III • Elément déclencheur : complexes immuns • Dépôt dans : le lit vasculaire, au sein de tissus, ou sur la surface de membranes basales. • Les états d’hypersensibilité de type III peuvent être divisés en : I-LES COMPLEXES IMMUNS : 1-La formation des complexes immuns : ➔ La taille d’un complexe immun est fonction : 1. L’antigène (Taille/ nombre de déterminants (si le nombre augmente la taille augmente) /propriétés physicochimique) 2. L’anticorps (la Valence : IgM (5) forme des complexes plus grd que IgG (2)/ l’affinité : si elle augmente la taille augmente 3. De leurs concentrations respectives 4. Des réactions entre le complexe immun et d’autres constituants plasmatiques. 2-Le devenir des complexes immuns en physiologie

➔A L’ETAT NORMAL : a. Captation grâce aux récepteurs CR1 sur les GR (par le fragment C3b) b. Epuration : dégradation par les macrophages hépatiques et spléniques. NB : Cellules circulantes portant des CR1 à leur surface : • Erythrocytes / cellules épithéliales glomérulaires • Granulocytes / Monocytes • Lymphocytes B / lymphocytes TCD4+ / CD • Les cellules de Langerhans cutanées A l’etat pathologique : ➔ ALTERATION DE LA FONCTION D’EPURATION ➔ HS type III

Hypersensibilité type III

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CETTE ALTERATION DE L’EPURATION ➔HS TIII peut être du a -Le déficit Déficit Le déficit en Déficience de la primaire en secondaire en CR1 des phagocytose : composants du composants globules complément : du rouges : complément : - déficit - déficit >Le déficit en - prédispositions héréditaire en primaire en CR1 acquis : génétiques composants de certains - le nombre de - une diminution la voie facteurs de CR1 est de l’expression classique régulation de diminué sur la des récepteurs d’activation du l’activation surface des pour le complément - - Comme le vieux GR. complément et le Le déficit facteur H, > perte de fragment Fc des acquis : est la / le facteur I … récepteurs immunoglobulines conséquence CR1 causée Par à la surface des d’une : cellules consommation -l’activité phagocytaires : du des protéines protéolytique fait d’interactions du des cellules répétées avec les complément phagocytaires complexes. Ex: suite à une avec lesquelles exposition les prolongée à un érythrocytes agent exogè entrent en ne, infectieux contact, ou non et lors notamment au des maladies niveau du foie. autoimmunes. - >Les érythrocytes de patients atteints de LES et PR montrent un déficit en CR1.

Hypersensibilité type III

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➢ Les Hyper sensibilités type 3 peuvent être divisé en :

Réactions systémiques ➢ Due a des : complexes immuns solubles ➢ Circulants se forment à distance du lieu où ils vont induire des lésions - le prototype est la maladie sérique. ➢ Dans les situations d’excès d’Ag : En cas d’infestation massive en Ag : ➢ Les complexes immuns formés sont de petite taille, et n’activent pas efficacement le système du complément et interagissent faiblement avec les FcR. -Forme des complexes : Solubles ➢ Forment des dépôts et donc des lésions a distance.

Hypersensibilité type III

Réaction locales ➢ Due à des complexes immuns insolubles ➢ Formés localement au point de pénétration de l’antigène dans l’organisme et entraînent des lésions tissulaires a ce niveau. - ce phénomène est appelé phénomène d’Arthus ➢ Dans les situations d’excès d’AC : En cas d’immunisation répétée (préalablement sensibilisé auparavant) - l’antigène en faible quantité -formation de complexes immuns de grande taille qui auront la propriété de se précipiter rapidement à l’endroit de l’introduction de l’antigène avant même l’action de solubilisation des complexes immuns par le complément. ➢ AC tend a contenir l’Ag au lieu de pénétration

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TDD : HS TIII systémique ➔Complexes immuns petits solubles se fixent au sein de la paroi de vaisseaux capillaires en des sites de prédilection : ➔ les glomérules rénaux ➔ le corps ciliaire de l’œil ➔ la jonction dermoépidermique ➔ la synoviale articulaire.

TDD : HS TIII LOCALE • Un processus inflammatoire se développe localement et peut être à l’origine de lésions tissulaires. (Complexe immun va entrainer la dégranulation de mastocytes qui fait appel a des PNN) • Une telle réaction est connue sous le nom de réaction d’Arthus.

•

Ces complexes déclenchent : l’activation de voies effectrices délétères pour les tissus Entrainant : des vascularites /manifestations microthrombotiques. -Modèles en pathologie humaine : 1- Maladies autoimmunes : - LE LED 2- Processus infectieux: - Endocardite - glomérulonéphrite - Hépatite B, C - Les infections parasitaires Modèles expérimentaux : 1- La maladie sérique aigue : Qlq jours Une injection intraveineuse unique à un lapin d'une forte dose de BSA (Bovin sérum albumin), purifiée et radiomarquée(J0) : Hypersensibilité type III

Modèles en pathologie humaine : Les pneumopathies allergiques extrinsèques : ➔La «maladie du poumon du fermier» : Est due à une inhalation répétée de spores !! d’actinomycètes thermophiles contenus dans du foin humide et moisi. ➔La «maladie des éleveurs d’oiseaux» : est due à l'inhalation d'antigènes contenus dans les fèces d’oiseaux -conduit à la formation de complexes immuns au niveau de la paroi alvéolaire, et à l’activation locale de mécanismes effecteurs délétères pour l’intégrité tissulaire. -Les manifestations cliniques apparaissent dans les 5 à 10 heures qui suivent une 90

>Dans un premier temps (J3-J6) : catabolisme normal des protéines. >7ème jour environ : une accélération de la clairance de l'antigène. >Seconde phase (J7-J13) : -réponse humorale aboutissant à la production d'anticorps et à la formation de complexes- immuns en excès d'antigènes. ➔manifestations viscérales : Cutanée, rénales, articulaires Au fur et à mesure que les anticorps sont produits, l’équilibre antigène/anticorps se déplace et des complexes de plus grande taille sont formés. Ces derniers sont éliminés plus activement. 2- la maladie sérique chronique : -se prolonger au-delà de quelques jours - si les injections d’antigènes sont répétées. De nouveaux complexes sont alors formés et peuvent avoir une action pathogène. Les lésions tissulaires observées sont de plus grande intensité et touchent plus particulièrement les glomérules rénaux, c’est la maladie sérique chronique. •Les réponses varient en Hypersensibilité type III

exposition à l’antigène (une toux + dyspnée+ râles crépitant + signes généraux) HISTO : Alvéolite aiguë, associée à une vascularite et à l’exsudation dans les espaces alvéolaires. Modèles expérimentaux : Réaction d’Arthus cutanée : -L’injection d'un antigène par voie intradermique ou souscutanée à un animal préalablement immunisé par voie générale (qui développe donc des taux élevés d'anticorps circulants spécifiques de cet antigène), conduit à la formation de complexes immuns localisés qui méditent une réaction d'Arthus cutanée : Une réaction œdémateuse et érythémateuse accompagnée de lésions purpuriques se développe en quelques heures -Atteint son maximum entre 4 et 10 heures (en Moyenne 6 Heures) Puis s’atténue et disparait généralement après 48h. ➔La réaction d’Arthus cutanée peut être 91

fonction de la réponse Ac de l’animal : 1- Non répondeurs : Ne développent pas de glomérulonéphrite 2- Bon répondeur :

dvpent une glomérulonéphrite réversible (comme la maladie sérique aigue) Faible répondeurs : Dvpent une glomérulonéphrite chronique extra membraneuse

provoquée passivement par l’injection d’immunoglobulines par voie intraveineuse suivie d'une injection locale de l'antigène correspondant. Une réaction d'Arthus inversée a été décrite, dans celle-ci on injecte par voie intradermique un anticorps après avoir injecté par voie systémique l'antigène correspondant. Le résultat est voisin de celui de la réaction directe.

➔Bonus : La maladie sérique expérimentale ne protège pas contre une récidive en cas d’une réinjection du mm Ag.

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Hypersensibilité type III

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Hypersensibilité type IV - Elément déclencheur : Ag solubles dérivés de : ➔ Pathogènes intracellulaires ➔ Métaux ➔ Ag du soi ➔ MALADIE COELIAQUE - Effecteur : médiation cellulaire : Macrophages + LT Evoluant en (2) phases : La phase de Phase de déclenchement (symptomatologique) sensibilisation -survenant dans les 24 à 72h : Premier contact Suivant un 2ième contact avec le même antigène Silencieuse (Ag sensibilisant). On distingue : 1. Hypersensibilité de contact 2. Hypersensibilité tuberculinique 3. Hypersensibilité granulomateuse. I-HYPERSENSIBILITE DE CONTACT : -Elle se développe au point de contact avec l'antigène et se manifeste par un ECZEMA DE CONTACT. ++++ Intéressant : Eczéma de contact Dermatite atopique Hypersensibilité type 4 Hypersensibilité type 1 - L’Ag est un HAPTENE (PM< 1 Kd), qui pénètre dans l’épiderme et se conjuguer aux protéines de la peau (de manière covalente). Ce qui conduit à la formation d'un Néo-Ag. cours de la phase de Au cours de la phase de sensibilisation: (10 -14) déclenchement -LE NEO-Ag est pris en charge par -Déclanchement dans les 10H (#HS les CPA (cellules de langerhans) type1 : immédiat ➔ médiation humorale : IgE) ➔ GG lymphatique (OLII) ➔pour le présenter au -Lors d'un 2ième contact avec le LTCD4+ associé à une molécule même Ag - le complexe haptène-protéine de HLA2 ➔Activation de LTH1 la peau est internalisé par la CL qui ➔MEDIATION CELLULAIRE s'active et sécrète des cytokines Hypersensibilité type IV

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pro-infammatoires activent l'endothélium des vaisseaux (expression des VCAM, ICAM 1), Le lit vasculaire est ainsi préparé à la migration trans-endothéliale des leucocytes. - On assiste à l'infiltration du derme et de l'épiderme par les cellules mononuclées et les LT. 1-Evolution : (24 - 72 h) : • Disparition de la réaction après élimination de I' Ag. • phase de résolution de la réaction Inflammatoire : Les cellules mononuclées, les kératinocytes ainsi que les mastocytes du derme interviennent dans cette Phase. II-HYPERSENSIBILITE TUBERCULINIQUE -Induite par des Ag solubles appartenant à divers micro organismes. -Elle a été décrite par KOCH : L'injection sous cutanée (IDR) d’Ag solubles dérivés du bacille tuberculeux (Tuberculine) provoque un état fébrile, un malaise général avec l'apparition d'une tuméfaction et une Induration au site d'injection. -Une IDR à la tuberculine positive est habituellement le témoin d’une tuberculose infection latente ou d’une tuberculose maladie, mais d’autres mycobactéries atypiques ou la vaccination par le BCG peuvent entraîner une réaction positive par réaction croisée. -Le diamètre de l’induration provoquée par des mycobactéries atypiques est généralement inférieur à celui observé en cas d’infection par le BK. -Cette réaction a été également décrite avec d'autres Ag microbiens dérivés du Mycobactérium leprae, de Leishmania tropica et d’Ag non microbiens : Beryllium, Zirconium. 1) Mécanisme : - la sensibilisation : Le Mycobacterium tuberculosis infectant un Individu sera pris en charge par les cellules dendritiques (CD) qui se chargent de l'apprêter et de le présenter aux LT CD4+ et LT CD8+.

Hypersensibilité type IV

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-L’IDR à la Tuberculine chez un tel sujet (déjà Infecté) entrant dans un 2ième contact avec l’Ag sensibilisant, induit l'activation des CL qui présentent I' Ag aux LT effecteurs mémoires. ➔Il y a production de cytokines pro inflammation ➔L’infiltrat cellulaire au niveau du derme est constitué de : - 80 - 90 % de Monocytes/macrophages. - PN. - LT CD4+ et LT CD8+ (les premiers en plus grande quantité). Les Macrophages sont les CPA dans cette réaction • les CD participent également. 2) Evolution : • Résolution en 5 - 7 j • Si I' Ag persiste dans les tissus : on obtient une hypersensibilité granulomateuse III-HYPERSENSIBILITE GRANULOMATEUSE Elle résulte de la persistance dans les macrophages de : • Microorganismes intracellulaires résistants • Particules que la cellule est incapable de détruire -Résultat : ➔Une stimulation chronique des LT + la production de cytokines + formation d'un « granulome » à cellules épithélioïdes caractérisé par : ➔Région centrale : contenant : des cellules épithélioïdes (dérivent des macrophages : sécrétent en permanence du TNF alpha qui entretient l’inflammation) + macrophages + cellules géantes (multinuclées : cellule de Langhans) ➔ la présence de la nécrose caséeuse dans le cas de la tuberculose. ➔Région périphérique : contenant : des lymphocytes + du collagène (fibrose) ➔prolifération fibroblastique. NB : La réaction de JONES MOTE : ➔ Injection intradermique (et non intraveineuse) d’Ag protéique ➔Résultat après 24 h, Suite à un afflux de Mastocytes - Intervention de LT spécifique

Hypersensibilité type IV

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Hypersensibilité type IV

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Déficits immunitaires congénitaux ➢ La plupart d’entre eux sont dus à des mutations, déficits rares. ➢ Signes cliniques : 1-Infections récidivantes et sévères Type du déficit Pathologie Déficit de l’immunité cellulaire Déficit immunitaire humoraux

Déficit de la Phagocytose

Déficit en complément (C3) ASPLENIE

Infection a germes intracellulaire dés les premiers mois de vie Infection a germes pyogènes extracellulaire, Survenant après le 6eme mois chez l’Enfant, rare chez l’adulte Survenant chez l’enfant, infection atypique, sans pus, granulomatose de la peau, poumon, os, priodonte Infection bactérienne récurrente (a NEISSERIA) pneumocoque méningocoque

Déficits immunitaires congénitaux

Fréquence parmi les DIH 22% LT 45% LB

17% PNN Monocyte Macrophage

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2-Manifestations auto-immunes Cytopénies, vascularites, lupus… 3-Hypoplasie des organes lymphoïdes : a- Ganglions, amygdales : dans les déficits humoraux ou cellulaires b- thymus : dans les déficits profonds de l’immunité cellulaire. 4-Syndrome lympho-prolifératif 5-Autres signes Syndrome malformatif, retard mental, signes neurologiques. - Epidemio : RARE /Plus fréquents, dans les populations à forte consanguinité. II-Classification 1-Les déficits humoraux : - Ne commence qu’après l’âge de 6mois (protection par les AC maternels), se manifestent essentiellement par des infections ORL et respiratoires causées par des germes encapsulés.

Déficits immunitaires congénitaux

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A-Agammaglobulinémies :

- Anomalie des LB circulants voir leurs absences conduit a un déficit complet en Ig - Agammaglobulinémie la plus fréquente est la maladie de BRUTON = - AGAMMAGLOBULINEMIE LIEE A L’X : due a une mutation de la tyrosine kinase de bruton (BTK) - Les Agammaglobulinémies autosomiques récessives sont plus rares ➔ ces patients sont asymptomatiques précocement dans la vie après perte des IgG maternelles. B-Syndromes d’hyper IgM :

- Mutation des gènes impliqués dans la commutation isotypique >> et parfois dans les hypermutations somatiques - Rappel :

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- Le syndrome d’hyper IgM est caractérisé par un taux d’IgM normal ou élevé avec un taux d’IgG et IgA bas ou indétectable - Le taux de LB est normal - Plusieurs défauts génétiques à l’origine du syndrome d’hyper IgM, 2 sont importants à connaitre : 1- Déficit en CD40L (lié a l’X) Ou en CD40 (autosomique recessif) : sont des déficits immunitaires combinés car les protéines CD40L et CD40 sont impliquées dans la coopération entre les LT et LB : on observe une association entre infections bactériennes et germes opportunistes (pneumocystose et cryptoporidiose) 2- Déficit autosomique récessif en AID (activation induced cytidine déaminase) : est du a un défaut intrinsèque des LB avec mutation du gène AID impliqué dans la réparation de l’ADN, ces patients ne présentent pas de déficit de l’immunité cellulaire, se voit chez l’enfant et l’adulte (ADP, infections pulmonaires et ORL) C-Déficit immunitaire commun variable :

- Hypogammaglobulinémie portant sur les IgG et les IgA +/- IgM sans diminution des LB, caractérisé par une production faible d’AC après immunisation par un Ag. III-Déficits immunitaires combinés sévères : - Absence de LT circulante : caractérisés par la survenue dès les premières semaines de vie d’infections récurrentes avec un tropisme avant tout respiratoire et digestif (infections opportunistes : pneumocystose, BCGite), diarrhée chronique avec cassure de la courbe de croissance, infections virales… - L’ensemble du Tissu lymphoïde est hypoplasique

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Les principales situations qui peuvent être rencontrées : Absence de LT, Absence de LT, Absence de LT, Absence isolée LB, NK LB NK de LT Déficit Absence de LT, Mutation du Défaut du gène autosomique R LB gène du récepteur de en adénosine Déficit AR des IL2RG codant l’IL7 ou des déaminase gènes pour la chaine gènes codant (ADA) RAG1 ou RAG2 : gamma du pour les codent pour des Récepteur à chain.es du CD3 protéines L’IL2 ou du gène impliquées dans JAK3 la réparation d’ADN IV-Déficits immunitaires combinés syndromiques : 1-WISCKOTT ALDRICH : - Lié a l’X, due à une mutation du gène WASP - Se manifeste par : Eczéma, thrombopénie, infections cellulaires et extracellulaires, manifestations auto-immunes, syndrome lymphoprolifératif.

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2-Ataxie télangiectasie : Mutation du gène ATM, se caractérise par une ataxie cérébelleuse progressive avec un déficit immunitaire cellulaire et une sensibilité aux radiations ionisantes (susceptibilité accrue aux cancers…) 3-Syndrome de Di George : - Anomalie des 3 et 4 arcs branchiaux - Anomalie des parathyroïdes (hypocalcémie), cardiaque (cardiopathie cono-troncales), thymique (déficit lymphocytaire T variable selon les patients), dysmorphie faciale - La mutation du gène TBX1 est responsable des anomalies thymiques observées dans ce syndrome donnant : • Une athymie complète (rare