Tinción Panóptico Rápido Poe [PDF]

Zitiervorschau

TINCIÓN PANÓPTICO RÁPIDO

PROPOSITO Utilizar un método distinto a los clásicos (Giemsa y Wright) que es de inmersión y mucho más rápido. ALCANCE 

Involucra al área de Hematología

RESPONSABLES 

Bioquímico responsable del área de Hematología

DEFINICIONES 

Giemsa: Es una tinción de tipo Romanowsky.



Wright: Es una tinción de tipo Romanowsky.



Panóptico rápido: Se trata de una modificación de la tinción de Romanowsky, dando un procedimiento basado en inmersiones mucho más rápido.

DESARROLLO DEL PROCEDIMIENTO Fundamento

La tinción de panóptico rápido es un método de tinción diferencial que permite la observación de las células sanguíneas. Debido a la interacción entre los colorantes se pueden diferenciar los núcleos y los gránulos de color violeta. Se trata de una modificación de la tinción de Romanowsky, dando un procedimiento basado en inmersiones mucho más rápido. Muestra 

Sangre capilar fresca o sangre venosa anticoagulada. Hay que realizar un extendido con un tipo de sangre y dejar secar.

Reactivos 

Panóptico rápido: -

Solución 1 Etanol (Fijador)

-

Solución 2 Eosina (Colorante ácido)

-

Solución 3 Azul de metileno (Colorante básico)

Materiales 

Guantes de latex



Extendido sanguíneo (ya realizado y seco)



Pinza



Cronometro



Piseta (con agua corriente o destilada)



Batería de Tinción



Soporte con ranuras para secado

Equipos 

No aplica

INSTRUCCIONES DETALLADAS Preparación del reactivo



Las soluciones de panóptico rápido comercial vienen ya preparadas y listas para su uso.

Procedimiento NOTA: Los tiempos de inmersión sugeridos en el prospecto del reactivo se pueden cambiar de acuerdo criterio del usuario para los ajustes necesarios. 

Realizar los extendidos sanguíneos y dejar secar a temperatura ambiente.



Disponer de una batería de tinción (cubeta de Wertheim, cuba de Coplin o similar) para depositar las soluciones 1, 2 y 3 respectivamente.



Sumergir el extendido en la solución 1 (Etanol) manteniendo un movimiento continuo de hacia arriba o hacia los lados durante poco más de 1 minuto y dejar escurrir bien.



Sumergir el extendido en la solución 2 (Eosina) manteniendo un movimiento continuo de hacia arriba o hacia los lados durante 20 segundos y dejar escurrir.



Sumergir el extendido en la solución 3 (Azul de Metileno) manteniendo un movimiento continuo de hacia arriba o hacia los lados durante 20 segundos y dejar escurrir bien.



Lavar con agua desionizada (preferiblemente tamponada a pH 7,0), secar al aire en posición vertical y con el final de la extensión hacia arriba.

Procedimiento 

En las tres cubetas de Wertheim vertimos las tres soluciones (una en cada cubeta).



Sumergimos el porta en el que tenemos la extensión en la solución nº 1 durante 1 segundo.Repetimos la inmersión cuatro veces ( en total 5 segundos ) y dejamos escurrir.



A continuación, sumergimos otras cinco veces, cada una de un segundo de duración, en la cubeta con la soluciónº 2 y dejamos escurrir otra vez.



Luego, sumergimos otras cinco veces de un segundo cada una en la cubeta con la solución nº 3.



Por último, lavamos con agua destilada la extensión y dejamos secar.



Solo queda observar al microscopio con el objetivo de 100 x con ayuda del aceite de inmersión.

Infraestructura 

Mesón de trabajo



Lavadero con agua potable



Iluminación natural



Iluminación artificial

Bioseguridad 

Referirse al procedimiento del Manual de Bioseguridad

Interferencias 

Método de tinción empleado. (Referirse al procedimiento indicado en este POE)



Solución 2 demasiado ácida.



Solución 3 demasiado alcalina.



Agua de lavado demasiado ácido. (Preferiblemente tamponada a pH 7.0)

Rangos de referencia 

No aplica

Interpretación de resultados Puede realizarse de forma visual observando la coloración que tomen los extendidos o bajo el microscopio evidenciando: 



Coloración excesivamente azul, debido a: -

Frotis excesivamente grueso.

-

Lavado insuficiente.

-

Tinción muy prolongada.

-

Empleo de colorante excesivamente alcalino.

Coloración con una tonalidad rosada:

-

El colorante, el tampón o el agua de lavado tienen un pH demasiado ácido.



Presencia de precipitados: -

Obedecen a una acción excesiva del colorante. Esto se puede evitar con la filtración.

Interpretación de los resultados: Las diferencias entre este método y las tinciones de Giemsa y Wright son: 

Es un método mucho más rápido, se tardan aproximadamente 15 segundos.



Es un método de inmersión, la extensión se sumerge en las distintas soluciones, al contrario que las otras tinciones, que hay que extender el colorante sobre la extensión.

Informe de resultados 

Referirse al procedimiento de fórmula leucocitaria y anomalías en el tamaño, la forma, el color o el recubrimiento de los glóbulos rojos.

Control de calidad 

Se debe realizar un control de pH tanto a las soluciones de tinción como al agua de lavado.

Formularios y registros 

No aplica

Referencias bibliográficas 

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Técnicas Básicas de Hematología. N° 40. 2005. Republica del Perú.



Fundamentos y aplicaciones en Hematología. 2º edición. Editorial Panamericana. Rodak.



Hematología práctica. Lewis, S. 10º edición. 2008. Elsevier.

Anexos



No aplica

Distribución 

Responsable de Toma de muestra copia 1



Responsable de área de Hematología copia 2



Responsable de laboratorio copia 3



Responsable de Calidad original