Poe Prueba Rapida Covid [PDF]

Zitiervorschau

HOSPITAL REGIONAL SAN JUAN DE DIOS

PROCEDIMIENTO POE- 06

LABORATORIO DE EMERGENCIA COVID 19 AREA DE SEROLOGIA

PRUEBA RAPIDA COVID - 19 REVISION. 00

FECHA DE ELABORACION 29-06-2020

FECHA DE APLICACIÓN

Pág.

OBJETIVO Realizar la detección y diferenciación cualitativa de anticuerpos IgM e IgG contra SARS-CoV-2 en suero, plasma (EDTA, citrato) o muestras de sangre a través de un inmunoensayo de flujo lateral. ALCANCE Pacientes internados y ambulatorios que acuden al área de Covid en el Hospital Regional San Juan de Dios.

RESPONSABLES Bioquímicos

FUNDAMENTO

La prueba rápida Cellex qSARS-CoV-2 IgG / IgM es un inmunoensayo cromatográfico de flujo lateral que puede detectar anticuerpos contra el virus SARS-CoV-2. El casete de prueba consta de: 1) una almohadilla conjugada de color burdeos que contiene antígenos recombinantes SARS-CoV-2 (proteínas S y N) conjugados con oro coloidal (conjugados SARS-CoV-2) y conjugados IgG-oro de conejo. 2) una tira de membrana de nitrocelulosa que contiene una línea IgG (línea G) recubierta con IgG antihumana, una línea IgM (línea M recubierto con IgM antihumana, y la línea de control (Línea C) recubierta con IgG anticonejo de cabra. Cuando se dispensa un volumen correcto de muestra de prueba en el pocillo de muestra del casete de prueba, la muestra migra por acción capilar a lo largo del casete. La IgG del virus anti-SARS-CoV-2, si está presente en la muestra, se unirá a los conjugados de SARS-CoV-2. Si hay IgG presente en la muestra, el inmunocomplejo será capturado por la línea de IgG antihumana, formando una Línea G de color burdeos, lo que indica un resultado positivo de la prueba de IgG del virus SARS-CoV-2. La IgM del virus anti-SARS-CoV-2, si está presente en la muestra, se unirá a los conjugados de SARS-CoV-2. El inmunocomplejo es luego capturado por la línea IgM antihumana, formando una línea M de color burdeos, lo que indica un resultado positivo de la prueba de IgM del virus SARS-CoV-2. La prueba contiene un control interno (Línea C) que debe exhibir una banda de color burdeos de inmunocomplejo conjugado de IgG anti-conejo de cabra / IgG de conejo-oro independientemente del desarrollo de color en cualquiera de las bandas de prueba (Líneas G y M). Si no se observa una banda de control, el resultado de la prueba no es

LINEALIDAD TIPO DE MUESTRA CANTIDAD RECOLECCION

válido y la muestra debe ser analizada nuevamente. No aplica suero, plasma (EDTA, citrato) o muestras de sangre completa 10 ul Obtención de plasma, suero y sangre entera a través de procedimiento estandarizado para toma de muestra sanguínea.

REACTIVOS Y MATERIALES EQUIPO

INSUMOS

Cassette de prueba Desecante Diluyente de muestras Micropipetas de 5- 50 ul. Centrifuga Tubos ependorf o tubos de plástico. Tips amarillos, azules Cronometro

TECNICA 1.- Para muestras frescas, comience con el Paso 2. Para muestras congeladas, lleve las muestras y los componentes de prueba a temperatura ambiente, y mezcle bien la muestra una vez descongelada. 2.- Cuando esté listo para la prueba, abra la bolsa en la muesca y retire el dispositivo de prueba. Coloque el dispositivo de prueba sobre una superficie limpia y plana. 3.- Etiquete el dispositivo con el número de identificación de la muestra. 4.- Utilizando una pipeta de transferencia, transfiera suero, plasma o sangre completa, tenga cuidado de no exceder bien la muestra. El volumen de la muestra es de alrededor de 10 μl. Sosteniendo la pipeta de transferencia verticalmente, dispense 10 μL de la muestra en el centro del pozo de muestra (pozo S) asegurándose de que no haya burbujas de aire. 5.- agregue 2 gotas de diluyente de muestra inmediatamente en el pocillo de muestra (pocillo S). 6.- Configura un temporizador. 7.- Lea los resultados en 15-20 minutos. No lea los resultados después de 20 minutos. PRECAUCION

CONTROL DE CALIDAD

Realizar todos los procedimientos con los equipos de protección personal establecidos. Considerar todas las muestras que ingresen como potencialmente infecciosas. Esta prueba contiene una función de control incorporada, la línea C. La línea C se desarrolla después de la adición de la muestra y el diluyente de muestra. Si la línea C no se desarrolla, la prueba no es válida. Revise el procedimiento y repita la prueba con un nuevo dispositivo.

INTERFERENCIAS

Se agregaron muestras de suero positivas para anticuerpos SARS-CoV-2 de bajo título y muestras de suero negativas para anticuerpos SARS-CoV2 con una de las siguientes sustancias a concentraciones específicas y se analizaron en múltiples repeticiones. NO SE ENCONTRÓ FALSA POSITIVIDAD O FALSA NEGATIVIDAD CON LO SIGUIENTE: Hemoglobina 10 mg / ml Bilirrubina Conjugada 0.4 mg / mL Bilirrubina no conjugada 0.4 mg / mL Triglicéridos 15 mg / ml Colesterol 4 mg / ml Anticuerpo humano anti-ratón (HAMA)800 ng / ml Factor reumatoide 2000 UI / ml Albúmina de suero humano 60 mg / ml Clorhidrato de histamina 4 mg / l α-IFN 200 mg / l Zanamivir 1 mg / l Carboxilato de oseltamivir 1 mg / l Abidol 40 mg / l Levofloxacina 200 mg / l Ceftriaxona 400 mg / l Meropenem 200 mg / l Tobramicina 10 mg / l Ribavirina 40 mg / l IgG humana 8 mg / ml IgM humana 0.4 mg / mL ENSAYO DE REACTIVIDAD CRUZADA La reactividad cruzada de la prueba rápida Cellex qSARS-CoV-2 lgG / IgM se evaluó utilizando muestras de suero o plasma que contienen anticuerpos contra los patógenos enumerados a continuación. NO SE ENCONTRÓ FALSA POSITIVIDAD O FALSA NEGATIVIDAD CON LO SIGUIENTE: Panel de coronavirus humano (recogido antes de octubre de 2019) HBV, VHC, VIH-1, VIH-2, Adenovirus, Metapneumovirus humano (hMPV), Virus de la parainfluenza 1-4, Influenza A, Influenza B Enterovirus 71, Virus sincitial respiratorio, Rinovirus, Chlamydia pneumoniae, sptreptococos neumonía, Tuberculosis micobacteriana, Mycoplasma pneumoniae, Virus EB.

VALOR DE REFERENCIA

Presencia de línea coloreada en zona control e IgG: Además de la presencia de la línea C, si solo se desarrolla la línea G, el resultado de la prueba indica la presencia del virus IgG anti-SARS-CoV-2. El resultado es IgG positivo o reactivo, consistente con una infección reciente o previa. Presencia de línea coloreada en zona control e IgM: Además de la presencia de la Línea C, si solo se desarrolla la Línea M, la prueba indica la presencia del virus IgM anti-SARS-CoV-2. El resultado es IgM positivo o reactivo, consistente con una infección aguda o reciente por el virus del SARS-CoV-2. Presencia de línea coloreada en zona control e IgM- IgG: Además de la presencia de la línea C, si se desarrollan las líneas G y M, la prueba indica

la presencia de virus IgG e IgM anti-SARS-CoV-2. El resultado es IgG e IgM positivo o reactivo, lo que sugiere una infección por virus SARS CoV-2 actual o reciente. Los resultados negativos no descartan la infección por SARS-CoV-2, particularmente para pacientes que han estado en contacto con personas infectadas conocidas o en áreas con alta prevalencia de infección activa. Las pruebas de seguimiento con una prueba de diagnóstico molecular son necesarias para descartar infección en estos individuos.

FORMULARIOS Y REGISTROS REDACTADO POR:

Registro en carpeta de resultados de pruebas rápidas, cada 300 pruebas en digital y físico. REVISADO POR:

APROBADO POR: